《海水中喹諾酮類抗生素的測定 HPLC-MSIMS》征求意見

　　【儀表網 儀表標準】根據《青島微藻產業學會團體標準管理辦法》，由青島微藻產業學會批準立項，中國水產科學研究院黃海水產研究所牽頭起草的《海水中喹諾酮類抗生素的測定 高效液相色譜-串聯質譜法》團體標準已完成征求意見稿，現公開征求意見，誠摯邀請各相關單位和個人對上述標準提出寶貴的意見和建議。
 

　　目前，我國對水產品中喹諾酮類抗生素的殘留已經展開了充分的調查研究，針對海洋環境中喹諾酮類抗生素的檢測也得到了越來越多的重視。已經報道的檢測方法中存在許多問題，比如待測的喹諾酮類抗生素種類不全、回收率不理想、靈敏度低等，而且現在針對此類抗生素在環境中的檢出尚無完整的一套檢測標準。因此，迫切需要建立海水中喹諾酮類抗生素的高靈敏度、準確、快速、簡便的檢測標準。
 

　　為了對環境中抗生素進行有效監控，由中國水產科學研究院黃海水產研究所牽頭，聯合青島浩澳環保科技有限公司、天祥(天津)質量技術服務有限公司青島分公司聯合起草標準，并申請作為青島微藻產業學會團體標準進行發布。本標準于2022年7月6日被青島微藻產業學會批準立項，團體標準立項號為T/QMIS 2022-03，團標名稱暫定為《海水中喹諾酮類抗生素的測定 高效液相色譜-串聯質譜法》。
 

　　本標準按照 GB/T 1.1-2020 給出的規則起草。參考GB/T 6379.2 測量方法與結果的準確度(正確度與精密度)第2部分：確定標準測量方法重復性與再現性的基本方法；GB/T 6682 分析實驗室用水規格和試驗方法；GB 17378.2 海洋監測規范第2部分：數據處理與分析質量控制；GB 17378.3 海洋監測規范第3部分：樣品采集、貯存與運輸等規程編制。
 

　　本方法規定了液相色譜-串聯質譜法(HPLC-MS/MS)測定海水中17種喹諾酮類藥物殘留量的樣品采集、處理、分析步驟、結果計算、質量保證和質量控制的方法和程序。
 

　　本方法適用于海水、河口水及入海排污口污水樣品中依諾沙星、麻保沙星、氧氟沙星、培氟沙星、氟羅沙星、洛美沙星、諾氟沙星、環丙沙星、奧比沙星、恩諾沙星、丹諾沙星、沙拉沙星、司帕沙星、雙氟沙星、噁喹酸、氟甲喹、萘啶酸單種或多種藥物殘留量的測定。
 

　　海水中喹諾酮類藥物的檢出限為5.0 ng/L，檢測定量限為20.0 ng/L。
 

　　方法原理：
 

　　海水樣品中的喹諾酮類藥物經固相萃取柱富集、凈化，用液相色譜-串聯質譜儀測定，內標法定量分析。
 

　　儀器和設備：
 

　　1.液相色譜-串聯四極桿質譜儀(LC-MS/MS)：配電噴霧離子源(ESI)。2.天平：感量 0.01g。3.分析天平：感量0.00001g。4.渦旋混合器。5.氮吹儀。6.pH 計。7.固相萃取裝置。8.固相萃取柱：500mg/6mL，Oasis HLB 柱或性能相當者。9.醋酸纖維濾膜：0.45µm。10.水相和有機相濾膜：0.22µm。11.尖底玻璃離心管：具刻度，10mL。12.棕色容量瓶：10 mL 、100mL和 500mL。
 

　　提取和凈化：
 

　　固相萃取柱(5.9)置固相萃取裝置(5.7)上，依次用6 mL甲醇和6 mL乙酸銨溶液(4.8)進行平衡活化，備用。
 

　　準確量取500 mL經0.45 µm醋酸纖維膜過濾后的海水樣品，加入適量鹽酸溶液(4.7)調節pH至3，準確加入1 µg/mL混合內標標準工作溶液50µL(4.16)，搖勻，以約5 mL/min的流速通過活化后的固相萃取柱。然后用10 mL乙酸銨溶液(4.8)淋洗，用氮氣吹至近干，用6mL甲醇(4.2)洗脫，收集洗脫液于10 mL尖底玻璃離心管(5.11)中，尖底玻璃離心管置于氮吹儀(5.5)內，40℃水浴下用氮氣吹至近干，殘留物用0.1%甲酸水-乙腈(4.10)稀釋至1mL，用渦旋混合器(5.4)渦旋混勻1 min，經0.22 µm水相和有機相濾膜(5.10)過濾至進樣瓶中，待測。
 

　　標準曲線繪制：
 

　　準確吸取混合標準工作溶液(4.15)適量，用 0.1%甲酸水-乙腈(4.10)逐級稀釋，配 制成濃度為 1、2、5、10、20、50、100 和 200 ng/mL 的標準系列溶液，同時加入混合內標標準工作溶液(4.16)，使內標濃度均為 50 ng/mL。以被測組分與其對應內標的峰面積比值為縱坐標，以系列標準溶液中各個組分含量與對應內標含量比值為橫坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程和相關系數。
 

　　精密度和準確度：
 

　　6家實驗室對10.0 ng/mL、50.0 ng/mL和100.0 ng/mL三個加標水平的海水樣品分別進行了5次重復測定：在10.0ng/m添加水平下，六家實驗室相對標準偏差為3.67%～5.41%；實驗室間再現性相對標準偏差為4.28%；在20.0ng/m添加水平下，六家實驗室相對標準偏差為3.67%～5.41%；實驗室間再現性相對標準偏差為4.28%；在50.0ng/m添加水平下，六家實驗室相對標準偏差為3.67%～5.41%；實驗室間再現性相對標準偏差為4.28%。