脂質(zhì)體介導(dǎo)DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)分析2017/2/16

脂質(zhì)體介導(dǎo)DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)分析脂質(zhì)體介導(dǎo)是目前條件下Z方便的轉(zhuǎn)染方法之一，適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細(xì)胞中，其轉(zhuǎn)染率高，優(yōu)于磷酸鈣法，比它高5～100倍，能把DNA和RNA轉(zhuǎn)染到各種細(xì)胞株。用L...

胰蛋白酶溶液的配制方法與消毒2017/2/14

胰蛋白酶溶液的配制方法與消毒胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞系間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在pH為8.0、溫度為37...

SHG-44細(xì)胞的轉(zhuǎn)染操作方法2017/2/9

SHG-44細(xì)胞的轉(zhuǎn)染操作方法(1)轉(zhuǎn)染當(dāng)天，加入脂質(zhì)體/DNA混合物之前的短時(shí)間內(nèi)，更換1ml新鮮的有血清或無血清培養(yǎng)基。(2)準(zhǔn)備不同比例的DOSPER/DNA混合物，以確定每個(gè)細(xì)胞系的比例。①溶...

正常肺細(xì)胞培養(yǎng)操作方法2017/2/7

正常肺細(xì)胞培養(yǎng)操作方法取出小鼠細(xì)胞系正常肺組織,在預(yù)冷的PBS液中盡量除去氣管、支氣管、血管組織,將小鼠肺組織上面的血污用PBS清洗后,剪成1mm3小塊,用0.25%的胰酶溶液清洗一次,繼續(xù)用0.25...

細(xì)胞株免疫組化染色基本技術(shù)及注意事項(xiàng)2017/1/24

細(xì)胞株免疫組化染色基本技術(shù)及注意事項(xiàng)①根據(jù)課題的內(nèi)容選用動(dòng)物，選用配套的Ab。如Ab-I鼠抗人的抗體，細(xì)胞株與其他種屬間無交叉，則不能用其他動(dòng)物，而且Ab-Ⅱ必須是羊抗鼠，若PAP法Ab-Ⅲ必須來源于...

原代細(xì)胞周期測(cè)定操作步驟2017/1/21

原代細(xì)胞周期測(cè)定操作步驟[實(shí)驗(yàn)器材]1．儀器原代細(xì)胞倒置顯微鏡，CO2培養(yǎng)箱，普通冰箱，超凈工作臺(tái)，低速冷凍離心機(jī)，顯微數(shù)碼攝影系統(tǒng)．水浴鍋。2．材料與試劑(1)非無菌材料酒精棉球，離心管架，血細(xì)胞計(jì)...

原代細(xì)胞傳代培養(yǎng)法操作注意事項(xiàng)2017/1/19

原代細(xì)胞傳代培養(yǎng)法操作注意事項(xiàng)原理原代細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后，已基本上飽和，為使細(xì)胞能繼續(xù)生長(zhǎng)，同時(shí)也將細(xì)胞數(shù)量擴(kuò)大，就必須進(jìn)行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用...

細(xì)胞減數(shù)分裂的具體過程2017/1/17

細(xì)胞減數(shù)分裂的具體過程這種原代細(xì)胞分裂形式是隨著配子而出現(xiàn)的，凡是進(jìn)行有的動(dòng)、植物都有減數(shù)分裂過程。減數(shù)分裂與正常的有絲分裂的不同點(diǎn)，在于減數(shù)分裂時(shí)進(jìn)行2次連續(xù)的核分裂，細(xì)胞分裂了2次，其中染色體只分...

細(xì)胞株培養(yǎng)的基本技術(shù)2017/1/12

細(xì)胞株培養(yǎng)的基本技術(shù)為了減少污染對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的影響，必須建立細(xì)胞凍存庫(kù)。當(dāng)需要做實(shí)驗(yàn)時(shí)從主細(xì)胞庫(kù)中復(fù)蘇細(xì)胞建立工作細(xì)細(xì)胞株庫(kù)。每一個(gè)凍存標(biāo)本都應(yīng)明確記錄細(xì)胞的性質(zhì)、代數(shù)及有無污染。同時(shí)還應(yīng)建立規(guī)范的檢測(cè)...

原代細(xì)胞懸液標(biāo)本制備實(shí)驗(yàn)步驟2017/1/10

原代細(xì)胞懸液標(biāo)本制備實(shí)驗(yàn)步驟(1)取材：原代細(xì)胞收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞于離心管中，800～1000r／min離心10min，棄上清，彈指法混勻細(xì)胞。沿管壁加入2．0％～2．5％冷戊二醛，輕輕吹打，4℃固定...

原代細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)化方法2017/1/5

原代細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)化方法1)選用密度的健康細(xì)胞細(xì)胞的匯合度應(yīng)為40–80%，并且傳代次數(shù)較低(比如小于50次)，即細(xì)胞不可太老。隨著時(shí)間的推移，相對(duì)于較早傳代的細(xì)胞，培養(yǎng)原代細(xì)胞的表型和生長(zhǎng)特性通常會(huì)呈...

原代細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)分析2017/1/3

原代細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)分析原代培養(yǎng)(PrimaryCulture)也稱初代培養(yǎng)，是指從體內(nèi)或組織中取出的細(xì)胞直接進(jìn)行培養(yǎng)，到*次傳代的階段，此階段一般可持續(xù)1-4周。原代培養(yǎng)所獲得的細(xì)胞培養(yǎng)物即為原代細(xì)胞...

污染是ATCC細(xì)胞培養(yǎng)的大敵2016/12/29

ATCC細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染不僅僅指微生物，而且還包括所有混入培養(yǎng)環(huán)境中的、對(duì)細(xì)胞生存有害或造成細(xì)胞不純的物質(zhì)，包括生物和化學(xué)物質(zhì)。一、細(xì)菌污染細(xì)菌污染是實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染，即使在細(xì)胞培養(yǎng)液中...

干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)原理和實(shí)驗(yàn)流程2016/12/27

干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)原理在體胚胎分化過程中，組織發(fā)生和身體構(gòu)造的形成具有時(shí)空順序性和相互誘導(dǎo)性。在個(gè)體發(fā)育過程中，細(xì)胞分化是程序控制的有序有規(guī)律過程，程序的運(yùn)行結(jié)果表現(xiàn)為不同發(fā)育階段、不同組織部位的細(xì)胞表現(xiàn)出...

研究細(xì)胞間是怎樣進(jìn)行化學(xué)通訊的2016/12/22

研究細(xì)胞間是怎樣進(jìn)行化學(xué)通訊的研究人員一直在研究控制細(xì)胞的方法，以觀察兩個(gè)細(xì)胞膜之間的直接接觸，或控制它們保持各種距離，研究細(xì)胞之間是怎樣通訊的。聲鑷的價(jià)值在于可用它來研究細(xì)胞之間的信息傳遞。它能把細(xì)...