ELISA檢測試驗雙抗體夾心法和競爭法比較

酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體結(jié)合專一性進行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。它是應(yīng)用最多的一種免疫酶技術(shù)。ELISA試劑盒（ELISAKits）已成為藥物和植物病理學(xué)研究中的常用診斷工具，是檢測組織提取液、血清和細胞培養(yǎng)液中目標(biāo)抗體/抗原的理想工具，也是重要的質(zhì)量控制手段。

ELISA檢測試驗雙抗體夾心法和競爭法有以下幾個方面的比較：

1、原理:

雙抗體夾心法：利用兩種針對抗原不同表位的特異性抗體，一種包被在固相載體上捕獲抗原，另一種用酶標(biāo)記用于檢測被捕獲的抗原，形成“固相抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體"復(fù)合物。

競爭 ELISA 法：分為直接競爭法和間接競爭法。直接競爭法是將酶標(biāo)記的抗原和待檢測的未標(biāo)記抗原競爭結(jié)合固相抗體；間接競爭法是將未標(biāo)記抗原和固相抗原競爭結(jié)合待檢測的抗體，然后用酶標(biāo)二抗檢測結(jié)合的抗體。

2、檢測對象:

雙抗體夾心法：主要用于檢測大分子抗原。

競爭 ELISA 法：直接競爭法適合檢測小分子半抗原，間接競爭法適合檢測抗體。

3、標(biāo)準(zhǔn)曲線:

雙抗體夾心法：標(biāo)準(zhǔn)曲線通常為“S"型，隨著抗原濃度增加，吸光度值上升。

競爭 ELISA 法：標(biāo)準(zhǔn)曲線通常為“反 S"型，隨著待測物濃度增加，吸光度值下降。

4、靈敏度:

雙抗體夾心法：靈敏度較高，尤其對于含量較低的抗原。

競爭 ELISA 法：直接競爭法對小分子檢測的靈敏度較高。

5、特異性:

雙抗體夾心法：特異性較高，需要兩種抗體與抗原的特異性結(jié)合。

競爭 ELISA 法：特異性相對略低，尤其在競爭不全的情況下。

6、操作復(fù)雜性:

雙抗體夾心法：步驟相對較多，操作較復(fù)雜。·

競爭 ELISA 法：操作相對簡單。

7、應(yīng)用場景:

雙抗體夾心法：常用于生物醫(yī)學(xué)中蛋白質(zhì)、細胞因子等大分子物質(zhì)的檢測。

競爭 ELISA 法：常用于藥物殘留、激素等小分子物質(zhì)的檢測。