ELISA標(biāo)準(zhǔn)品正確溶解與稀釋

正確溶解與稀釋ELISA標(biāo)準(zhǔn)品

ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線是結(jié)果計(jì)算的尺子，標(biāo)準(zhǔn)品是ELISA 實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵點(diǎn)。怎樣正確溶解、稀釋標(biāo)準(zhǔn)品呢？

1. 粉末標(biāo)準(zhǔn)品短暫離心，讓因運(yùn)輸沾到管蓋、管壁的標(biāo)準(zhǔn)品沉到管底。

2. 根據(jù)瓶標(biāo)簽加入一定體積的蒸餾水，加水后輕柔渦旋震蕩，室溫靜置溶解 10-30min，讓粉末全溶解。

注意：加水后暫不用移液槍吹吸，避免蛋白未溶解，槍頭帶出部分蛋白，待全溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。

3. 標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋:

（1）標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的選擇：

若血清、血漿、組織勻漿樣本，用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

若細(xì)胞上清樣本，建議用細(xì)胞培養(yǎng)基梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

（2）耗材準(zhǔn)備：準(zhǔn)備8個(gè)1.5Ml離心管，寫上S1-S7、空白。

（3）梯度稀釋：根據(jù)說明書，每管加入等體積的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液（培養(yǎng)基）。吸取同體積溶解好的標(biāo)準(zhǔn)品到S1管中，吹打10次混勻，渦旋5S。從S1管中吸取同體積溶液到 S2管，吹打10次混勻，渦旋5s。同法稀釋S3-S7濃度。

（4）空白: 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液（培養(yǎng)基）作為空白即零濃度。

注意：梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)，渦旋震蕩混勻后可短暫離心，讓到蓋子、壁上的液體到管底，再開始稀釋下個(gè)濃度。