噬菌體制備及定量的一般實驗方案2012/9/22

大部分噬菌體展示方案都涉及這樣一個基本步驟：從被感染的細(xì)菌中制備噬菌體或噬菌粒顆粒的儲液（增殖），并滴定這些儲液以測定有感染力的顆粒的濃度。對于噬菌體載體（以及輔助噬菌體），對于噬菌體載體（以及輔助噬...

影響標(biāo)記蛋白的主要因素2012/9/20

該系統(tǒng)的主要影響因素是因在蛋白上引入標(biāo)記物可導(dǎo)致蛋白生物活性改變，因為標(biāo)記的結(jié)果，本質(zhì)上是制造了一個由目的蛋白和標(biāo)記物氨基酸序列融合而成新的蛋白。因此，使用該技術(shù)時，應(yīng)該認(rèn)識到是研究新的蛋白特性，而不...

為何使用標(biāo)記蛋白2012/9/20

標(biāo)記蛋白具有許多優(yōu)點。原則上，該方法為檢測各種細(xì)胞成分中感興趣的蛋白提供廠新的手段。①如果開放閱讀框已經(jīng)被克隆化，但是由于蛋白是新發(fā)現(xiàn)的，或者由于蛋白免疫原性較弱，目前尚沒有針對該蛋白產(chǎn)物的抗體時，此...

用抗人抗體包被微珠2012/9/18

[器材和試劑]●磁珠（DynabeadsM-450，甲苯磺酰活化，Dynal）●硼酸鹽緩沖液（50mmol/L硼酸鈉，pH9．5）每抗人Fc多克隆抗體（免疫純的羊抗人IgGFc片段特異性抗體，Pier...

UV滅活載體噬菌體的制備2012/9/18

[器材和試劑]●XL1-B1ue或者DHF’TB細(xì)胞●f1R1噬菌體●TB●TBS（tris緩沖鹽水；50mmol/LTris-HCLpH7．6,150mmol/LNaCl，0．05％硫柳汞）●PEG...

選擇雜交瘤細(xì)胞及抗體檢測2012/9/15

1．HAT選擇雜交瘤細(xì)胞脾細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)PEG處理后形成多種細(xì)胞的混合體，只有脾細(xì)胞與骨髓細(xì)胞形成的雜交瘤細(xì)胞才有意義。在HAT選擇培養(yǎng)液中培養(yǎng)時，由于骨髓瘤細(xì)胞缺乏胸苷激酶或次黃嘌呤*核糖轉(zhuǎn)移酶...

雜交瘤技術(shù)的基本原理2012/9/15

雜交瘤抗體技術(shù)的基本原理是通過融合兩種細(xì)胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細(xì)胞分別是經(jīng)抗原免疫的小鼠B細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞。脾淋巴細(xì)胞的主要特征是它的抗體分泌功能和能夠在選擇培養(yǎng)基中生長（選擇原理見后...

ELISA技術(shù)與自動化2012/9/11

在一般的概念里，ELISA技術(shù)的可操作性強，不需復(fù)雜設(shè)備，甚至*手工加樣、洗板和肉眼判讀結(jié)果，便可完成該技術(shù)的操作。隨著人們對質(zhì)量控制意識的加強，盡可能做到低限度的減少系統(tǒng)誤差，以及減少勞動強度等觀念...

標(biāo)準(zhǔn)品的制備、鑒定、計量2012/9/11

1．標(biāo)準(zhǔn)品的制備：標(biāo)準(zhǔn)品的制備是非常復(fù)雜的問題，也是標(biāo)記免疫分析中比較難于制備的一個成分。以下討論的是實驗室標(biāo)準(zhǔn)品（或商品化試劑中標(biāo)準(zhǔn)品）的制備。1）基質(zhì)的制備：如前所述，作為標(biāo)準(zhǔn)品的介質(zhì)（基質(zhì)）成分...

蛋白質(zhì)純化膠體過濾法2012/9/7

?同大小的蛋白質(zhì)分子進(jìn)入膠體過濾管柱，可依其分子?差異分離；是一種廣泛應(yīng)用的partition色析法（Pharmacia操作手冊,GelFiltration）。儀器設(shè)備：色析管柱（PharmaciaC...

酶活性分析法檢定蛋白質(zhì)2012/9/7

表現(xiàn)出?的酶GUS可以水解其基質(zhì)衍生物pNPG，所產(chǎn)生的黃色生成物p-nitrophenol，可供活性測定（Jeffersonetal,1986）；儀器用具：ELISA光?計（Dynatech）；微?...

五音不全可能是意識方面的問題2012/9/4

神經(jīng)學(xué)家針對音盲（tonedeafness）的病患進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，原因可能并不在腦中，而可能是意識方面的問題。對音盲（tonedeafness）的人來說，他們沒有辦法感受到自己所聽到的音樂，因為他們沒有...

三洋電機將致力于細(xì)胞治療相關(guān)市場的開發(fā)2012/9/4

7月2至4日“第7屆生物學(xué)EXPO”在東京有明會展中心舉辦，三洋電機介紹了該公司在生物、醫(yī)療領(lǐng)域的研究成果，并表示將繼續(xù)致力于細(xì)胞治療相關(guān)市場的開發(fā)。細(xì)胞治療是指對取自健康人體上的細(xì)胞在無菌環(huán)境下進(jìn)行...

極地冰川存在古老病毒會重返現(xiàn)代社會2012/8/27

據(jù)《新聞晨報》報道國內(nèi)外海洋、氣候、冰川病毒專家發(fā)現(xiàn)，存活了近14萬年的病毒毒株都在極地冰層中蟄伏，等待時機*釋放，而今夏世界各地超乎尋常的天氣預(yù)示著這種威脅正向人類走來。發(fā)現(xiàn)威脅，極地冰川存在病毒。...

轉(zhuǎn)基因?qū)⒁呙缛谌腚u蛋研究生產(chǎn)急救疫苗2012/8/27

一個雞蛋，能讓人們的免疫力短時間內(nèi)暴增，抵抗住禽流感、肝炎等病毒的侵襲，贏得治療時間，這一幕將不再是科幻場景。昨天，在上海召開的新發(fā)、再發(fā)傳染病防控對策研討會上，復(fù)旦大學(xué)醫(yī)學(xué)院的聞玉梅院士透露，一種能...