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    顆粒培養基使用方法與注意事項

    時間:2023/11/20閱讀:411
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    使用方法:
    1、取瓶內弧菌顯色培養基干粉71.3克,用1000ml蒸餾水或純水溶解,可按比例擴增或縮小。攪拌加熱煮沸至*溶解,不需高壓滅菌,冷至約50℃,傾注滅菌平皿。
    2、以無菌操作取檢樣25 g(mL),加入3%氯化鈉堿性蛋白胨水225 mL,用旋轉刀片式均質器以8 000 r/min均質1 min,或拍擊式均質器拍擊2 min,或用Pulsifier脈沖式樣品處理器均質30秒,制備成1:10的均勻稀釋液。如無均質器,則將樣品放入無菌乳缽中磨碎,然后放在500 mL的滅菌容器內,加225 mL3%氯化鈉堿性蛋白胨水,并充分振蕩。
    3、增菌:將上述1:10稀釋液于36 ±1 ℃培養8~18h。
    4、分離:在增菌液中用接種環取一環,于弧菌顯色平板上劃線分離,于36 ±1 ℃培養18~24 h。5、通過驗證試驗進一步確認假定性副溶血性弧菌和其他弧菌,如氧化酶、革蘭氏染色、生化鑒定等。進一步的試驗。
    注意事項:
    1. 稱量時注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統不適。
    2. 干粉培養基使用后立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結塊。
    3. 自制平板時需注意培養基的厚度,厚度過薄容易造成瓊脂水分保持性下降,開裂;因此,一般需要15-20mL(Φ90mm)體積培養基,平板培養基厚度至少為2mm。
    4. 即用型成品平板應該盡量保持在2-8℃下保存且與存放容器冷凝管保持一定距離以避免凍損壞。產品多次在低溫與常溫之間變更會引起瓊脂的泌水,屬于正常現象。使用前應平衡至室溫且盡量在無菌干燥箱中預干燥。

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