產(chǎn)品屬性：
| 產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 輔酶ⅠNAD測試盒50管/24樣 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | BJ-01S9511 |
商品介紹：
測定意義
輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循環(huán)（TCA）的主要氫受體，生成的NADH經(jīng)呼吸電子鏈（ETC）傳遞把電子交給氧，在合成ATP的同時，形成大量的ROS，同時NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質(zhì)三大代謝物質(zhì)分解中的氧化反應(yīng)絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評價糖酵解和TCA循環(huán)的強弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說明細(xì)胞呼吸耗氧量較高，處于過氧化狀態(tài)。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環(huán)。另外，NAD+降解產(chǎn)物對細(xì)胞信號傳導(dǎo)、代謝和基因表達(dá)等具有重要的調(diào)控作用。
測定原理
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH，NADH通過PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍(lán)（MTT）為甲瓚，在570nm下檢測吸光值；而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH，進(jìn)一步采用MTT還原法檢測。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用
樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。
2）. 過濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 （果糖含量測試盒說明書過過濾）。
4 ）. 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。
乙醇脫氫酶（ADH）測試盒 微量法 乙醇脫氫酶測試盒100管/96樣
乙醇脫氫酶（ADH）測試盒 紫外分光光度法 乙醇脫氫酶測試盒50管/48樣
單脫氫抗壞血酸還原酶（MDHAR）測試盒 微量法 單脫氫抗壞血酸還原酶測試盒100管/96樣
單脫氫抗壞血酸還原酶（MDHAR）測試盒 紫外分光光度法 單脫氫抗壞血酸還原酶測試盒50管/48樣
甲醛脫氫酶（FDH）測試盒 微量法 甲醛脫氫酶測試盒100管/96樣
甲醛脫氫酶（FDH）測試盒 紫外分光光度法 甲醛脫氫酶測試盒50管/48樣
乙醛脫氫酶（ALDH）測試盒 微量法 乙醛脫氫酶測試盒100管/96樣
乙醛脫氫酶（ALDH）測試盒 紫外分光光度法 乙醛脫氫酶測試盒50管/48樣
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒 微量法 輔酶ⅡNADP測試盒100管/48樣
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒 可見分光光度法 輔酶ⅡNADP測試盒50管/24樣
NADP磷酸酶（NADPase）測試盒 微量法 NADP磷酸酶測試盒100管/96樣
NADP磷酸酶（NADPase）測試盒 可見分光光度法 NADP磷酸酶測試盒50管/48樣
6磷酸葡萄糖脫氫酶（G6PDH）/葡萄糖6磷酸脫氫酶測試盒 微量法 6磷酸葡萄糖脫氫酶測試盒100管/96樣
6磷酸葡萄糖脫氫酶（G6PDH）/葡萄糖6磷酸脫氫酶測試盒 紫外分光光度法 6磷酸葡萄糖脫氫酶測試盒50管/48樣
胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測試盒 微量法 胞漿異檸檬酸脫氫酶測試盒100管/96樣
胞漿異檸檬酸脫氫酶（ICDHc）測試盒 紫外分光光度法 胞漿異檸檬酸脫氫酶測試盒50管/48樣
NADP蘋果酸酶（NADPME）測試盒 微量法 NADP蘋果酸酶測試盒100管/96樣
NADP蘋果酸酶（NADPME）測試盒 紫外分光光度法 NADP蘋果酸酶測試盒50管/48樣
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（EGFP標(biāo)記）
人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（hMSCs）
人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪
人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝
人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞
小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞（EGFP標(biāo)記）
小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞（EGFP標(biāo)記）
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞（EGFP標(biāo)記）
人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
人腦血管平滑肌細(xì)胞
人海馬神經(jīng)元
人少突膠質(zhì)細(xì)胞
人星形膠質(zhì)細(xì)胞
小鼠成纖維細(xì)胞（EGFP標(biāo)記）
mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元
輔酶ⅠNAD測試盒50管/24樣MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元
MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞
MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞
操作流程：
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
