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    乙醛脫氫酶測試盒50管/48樣

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    具體成交價以合同協議為準
    • 型號
    • 品牌其他品牌
    • 所在地上海市
    • 更新時間2022-04-13
    • 廠商性質經銷商
    • 入駐年限8
    • 實名認證已認證
    • 產品數量9976
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    乙醛脫氫酶測試盒50管/48樣 產品詳情

    產品屬性:  

    產品名稱

    檢測方法

    規格

    貨號

    乙醛脫氫酶測試盒50管/48樣

    紫外分光光度法

    50管/48樣

    BJ-01S9537

    商品介紹:

    測定意義:

    乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種,廣泛存在于各種動物、植物和微生物體內。主要作用是將乙醛氧化成乙酸,在酒精代謝中起主要作用。在人類和許多動物體內,線粒體乙醛脫氫酶能把對生物體有害的醇類轉化,所以在細胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關注;同時,乙醛脫氫酶在分子生物學以及相關疾病的檢測方面有較廣泛的研究應用。

    測定原理

    在輔酶Ⅰ存在的條件下,乙醛脫氫酶催化乙醛和NAD+轉化為乙酸和NADH,在340nm處的吸光值會增加,測定340nm處的吸光值變化,可計算得到乙醛脫氫酶的活性。  

    自備實驗用品及儀器

    天平、離心機、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、蒸餾水。

    QQ截圖20220307153443.png 

    注意事項:

    ①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

    ②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

    ③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

    ④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

    ⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

    ⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。

    ⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

    ⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

    ⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用

    樣品制備:

    1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。

    2). 過濾混濁溶液。

    3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。

    4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。

    5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。

    6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。

    7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。

    8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。

    9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。

    10).含脂肪的樣品用熱水提取。

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    操作流程:

    1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

    2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

    3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

    4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

    5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

    6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

    7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

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