細胞凋亡之線粒體膜電位檢測

細胞凋亡檢測線粒體膜電位與細胞凋亡的關系
線粒體為一雙層膜圍成的囊狀結構, 外膜與內膜間的空腔稱為外室, 由內膜包圍的腔稱為內室或線粒體基質.線粒體外膜通透性較大, 分子質量在15 ku 以下物質可自由通過, 因此胞質成分與線粒體外室基本相似. 線粒體內膜通透性小, 分子質量大于1.5 ku 物質不易通過.但內膜存在一些載體蛋白與通道以便運輸某些物質. 質子泵存在于內膜, 它將基質內質子泵入外室, 從而形成橫跨線粒體內膜的線粒體跨膜電位( mitochondrial transmembrane potential , Δψm ) .跨膜電位內室為負, 外室為正.使一些正電荷熒光染料如rhodamine 123 、DiOC6 (3) 、JC-1 、CMX-ROS 可結合到線粒體基質。

實驗步驟——線粒體膜電位（JC-1染色）

1．收集細胞：包括漂浮在培養基上的細胞；之后，PBS或培養基重懸送樣，正常組細胞分出200μl體積不染色；
2．離心：1000轉/分，5分鐘，棄上清；
3．染色：加入200μl JC-1染液，混勻，37℃避光孵育15分鐘，上機；
4.洗滌：加入500μl 洗液；
5．離心：1000轉/分，5分鐘，棄上清，加入200μl 洗液，混勻，上機
JC-1做線粒體膜電位的優缺點
JC-1比Rhodamine 123更靈敏，比DIOC6(3)特異性更高；但細胞凋亡檢測JC-1占用了紅、綠熒光通道，很難與其它染料共用，而且對溫度、pH敏感。
人*(Cyt-C)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Cytochrome-C，Cyt-C ELISA Kit                        
人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human lipoprotein lipase，LPL ELISA Kit                        
人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human lipoprotein α，Lp-α ELISA Kit                        
人骨膠原交聯(Cr)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Crosslaps，Cr ELISA Kit                        
人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human cross-linked C-opeptides of Type Ⅰ collagen，CⅠCP ELISA Kit
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