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  • 上海莼試生物技術(shù)有限公司
    初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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    口腔支原體探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

    參  考  價(jià)面議
    具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

    產(chǎn)品型號(hào)50T

    品       牌

    廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

    所  在  地上海市

    更新時(shí)間:2020-06-08 11:21:46瀏覽次數(shù):157次

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    口腔支原體探針?lè)晒舛縋CR試劑盒注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

    參數(shù)規(guī)格:

    產(chǎn)品名稱(chēng):口腔支原體探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
    英文名稱(chēng):Mycoplasma orale
    貨號(hào):CP914625
    產(chǎn)品規(guī)格:50T
    產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
    產(chǎn)品保存:-20℃保存
    產(chǎn)品有效期:一年
    產(chǎn)品特點(diǎn):
    本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。

     



    原理:

    口腔支原體探針?lè)晒舛縋CR試劑盒所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,產(chǎn)品僅用于科研Z后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
    檢測(cè)方法
    1.SYBRGreenⅠ法:
    在PCR反應(yīng)體系中,加入過(guò)量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,發(fā)射熒光信號(hào),而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào),從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
    SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
    PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
    2.TaqMan探針?lè)ǎ?br />探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
    特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
        1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到。
        2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為。
        3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
        4.   實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
     5.   優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
        6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
    使用方法:
    一、樣品采集:
    1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
    2、血液樣品:用無(wú)菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
    3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
    4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
    一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
    1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DN段作為陽(yáng)性對(duì)照。
    2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
    3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
    4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
    5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
    6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
    7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

    以下是口腔支原體探針?lè)晒舛縋CR試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:
    L-絲標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱(chēng):L-Serine   :56-45-1

    L-脯標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱(chēng):L-Proline   :147-85-3

    L-丙標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱(chēng):L-Phenylalanine   :63-91-2

    丁二洛沙平標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱(chēng):Loxapine Succinate  :27833-64-3

    洛沙平相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱(chēng):Loxapine Related Compound A  :3454-96-4

    低密度聚乙烯標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱(chēng):Low-Density Polyethylene   :9002-88-4

    洛伐他汀標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱(chēng):Lovastatin   :75330-75-5

    氯沙坦鉀標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱(chēng):Losartan Potassium   :124750-99-8

    勞拉西泮相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱(chēng):Lorazepam Related Compound E  :773871-49-1

    勞拉西泮相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱(chēng):Lorazepam Related Compound D  :54643-79-7

    勞拉西泮相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱(chēng):Lorazepam Related Compound C  :93955-15-8

    勞拉西泮相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱(chēng):Lorazepam Related Compound B  :2958-36-3

    勞拉西泮相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱(chēng):Lorazepam Related Compound A  :2848-96-6

    勞拉西泮標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱(chēng):Lorazepam CIV  :846-49-1

    氯雷他定標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱(chēng):Loratadine   :79794-75-5

     石蠟切片組織P16蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:10/20次

     細(xì)胞P16蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:10/50 次

     細(xì)胞P16蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:10/50 次

     P16蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒  進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:5次

    P16蛋白免疫共沉淀分析試劑盒  進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:5次

    P16蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:25次

     細(xì)胞P21蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:10/20次

    載玻片細(xì)胞P21蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:10/20次

    冰凍切片組織P21蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:10/20次

    石蠟切片組織P21蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:10/20次
    口腔支原體探針?lè)晒舛縋CR試劑盒Fusarium nivale資源名稱(chēng)雪腐鐮刀菌(斜面)分離基物:雪腐病小麥人p2 ELISA試劑盒

    Streptomyceslincolnensis資源名稱(chēng)林肯鏈霉菌分離基物:土壤人AVP ELISA試劑盒

    morganella morganii資源名稱(chēng)摩氏摩根菌提供形式:凍干粉人PACAP ELISA試劑盒

    Escherichia coli EIEC資源名稱(chēng)腸道侵襲性大腸埃希氏菌提供形式:凍干粉人MAP-2 ELISA試劑盒

    Alcaligenes│eutrophus資源名稱(chēng)真氧產(chǎn)堿菌提供形式:凍干物人NF ELISA試劑盒

    Candida cylindracea資源名稱(chēng)柱狀假絲酵母提供形式:凍干物人KP ELISA試劑盒

    Providencia rettgeri資源名稱(chēng)雷氏普羅威登斯菌分離基物:從ATCC 9250中分離人NT ELISA試劑盒 

    熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
    產(chǎn)品僅用于科研取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
    ②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
    ③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
    ④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
    ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
    ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。

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