豬細(xì)胞間粘附分子3ELISA試劑盒?操作步驟

豬細(xì)胞間粘附分子3ELISA試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

 Galbibacter mesophilus 模式菌株

 Sphingomonas sanxanigenens 模式菌株

 Sphingobium scionense 

 Sphingobium scionense 模式菌株

 Cellulomonas carbonis 模式菌株

 發(fā)酵纖維單胞菌 模式菌株

 Bacillus psychrophilus =Sporosarcina psychrophila 產(chǎn)冷激蛋白

 Slackia equolifaciens 模式菌株

 長(zhǎng)赤細(xì)菌 模式菌株，產(chǎn)生細(xì)菌葉綠素

 海洋鹽單胞菌 模式菌株

 Georgenia muralis 模式菌株

 河流弧菌 模式菌株

 善變副球菌 

 干酪棒桿菌（乳酪棒桿菌） 模式菌株

 沼澤紅假單胞菌 用于微生物肥料，水產(chǎn)養(yǎng)殖，污水處理

 類(lèi)球紅細(xì)菌(球形紅桿菌) 降低糖蜜廢水

 深紅紅螺菌 模式菌株

 深紅紅螺菌 

 Sphingobium rhizovicinum 模式菌株

 Sphingobium japonicum 模式菌株

 腸炎沙門(mén)氏菌亞利桑那亞種 

 類(lèi)紅紅細(xì)菌 模式菌株

 短短芽孢桿菌 

 Dokdonella ginsengisoli 模式菌株

 Dokdonella fugitiva 模式菌株

 腸膜明串珠菌 產(chǎn)生右旋糖酐，做臨床輸液用