病毒糖蛋白抗體的生wu素化標記實驗要點

病毒糖蛋白抗體的生wu素化標記實驗要點：

1.如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應。因此,蛋白質在反應前要對 0.1mol/L碳suan氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生wu素化蛋白質之間的分子比按蛋白質表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結合位點可能因此被封閉,導致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生wu素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點時,或位于酶的催化位點時,生wu素化會降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性；

6.生wu素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及ben酚基,也可與糖基共價結合；

7.交聯反應后,應充分透析,否則,殘余的生wu素會對生wu素化抗體與親和素的結合產生競爭作用；

8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。

CREB結合蛋白抗體

腦蛋白9抗體

絲裂原誘導蛋白2抗體

鋅指蛋白393抗體

組蛋白賴氨酸特異性脫甲基酶1抗體

驅動蛋白樣蛋白1抗體

組蛋白甲基化KMT3B抗體

離子通道蛋白Kv4.3抗體

Killin-p53調節復制抑制蛋白抗體

賴氨酸tRNA的連接酶抗體

220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體

磷酸化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體

基爾曼氏細小病毒VP1/VP2抗體C端

鉀離子通道蛋白家族KCNQ1抗體

組蛋白H3 K9甲基轉移酶抗體

生物鐘KAT13D蛋白抗體

Kelch樣蛋白36抗體

鉀氯離子轉運蛋白KCC4抗體

磷酸化離子通道蛋白Kv1.3抗體

鉀離子通道蛋白家族成員4抗體

電壓門控性鉀通道蛋白亞基kv5.1抗體

電壓門控性鉀通道蛋白亞基kv6.1抗體

電壓門控性鉀通道蛋白亞基KV6.3抗體

磷酸化細胞內流鉀通道蛋白KCNJ1抗體

鈣激活鉀通道蛋白KCNT2抗體

細胞內流鉀通道蛋白Kir5.1抗體