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    轉基因大豆EPSPS基因核酸檢測試劑盒?反應五要素

    時間:2021/10/13閱讀:368
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    轉基因大豆EPSPS基因核酸檢測試劑盒反應五要素:


    參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+


    引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:


    ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。


    ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。


    ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。


    ④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。


    ⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。


    ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。


    ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。


    引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

    AFP4b蛋白抗體

    HIV-1病毒復制結合蛋白2抗體

    伴侶蛋白bc1同源復合體抗體

    心肌錨蛋白重復結構域1抗體

    抑制蛋白結構域蛋白1抗體

    抑制蛋白結構域蛋白2抗體

    抑制蛋白結構域蛋白3抗體

    抑制蛋白結構域蛋白4抗體

    雌二醇抗體

    淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體

    淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體

    轉錄激活蛋白crsp70抗體

    卵巢、胎盤、前列腺、睪丸蛋白22抗體

    錨蛋白重復結構域蛋白33B抗體

    載脂蛋白C3抗體

    細胞凋亡增強核酸酶抗體

    染色體脆弱性相關基因抗體

    磷酸化蛋白激酶B抗體

    銅轉運蛋白質β鏈抗體

    酰基輔酶A合成酶家族4抗體

    酸性磷酸酶樣蛋白2抗體

    AHNAK核蛋白2抗體

    二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體

    p53誘導蛋白5抗體


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