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  • 上海莼試生物技術(shù)有限公司
    初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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    ATCC細(xì)胞
    檢測(cè)試劑盒
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    分子生物學(xué)
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    大豆胰蛋白酶抑制因子ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟

    時(shí)間:2021/8/12閱讀:189
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    大豆胰蛋白酶抑制因子ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟:


    1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

    2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

    3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

    4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

    5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

    6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

    7. 溫育:操作同3。

    8. 洗滌:操作同5。

    9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

    10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

    11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

    人免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 

    人白細(xì)胞分化抗原CD40配體(CD40L/TNFSF5)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

    人CD163分子(CD163)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

    人軟骨糖蛋白39(GP39)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 

    人叢生蛋白(CLU)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

    人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 

    人組織因子(TF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

    人補(bǔ)體因子D(CFD)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 

    人Corin蛋白(CRN)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

    人C反應(yīng)蛋白(CRP)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  

    人趨化因子C-X3-C-基元配體1(CX3CL1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

    人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  


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