原代細(xì)胞生長狀態(tài)

1.首先，觀察原代細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2.用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4.靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

5.貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6.懸浮細(xì)胞：將原代細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
    進(jìn)口、國產(chǎn)        25克    高純，PC=90%
    進(jìn)口、國產(chǎn)        100克    
大豆氫化卵磷脂    進(jìn)口、國產(chǎn)    HSPC    1公斤    BR，PC=95%
蛋黃軟磷脂    進(jìn)口、國產(chǎn)    Lecithin from egg yolk    10克    BR
酵母氮源-無氨基酸    進(jìn)口、國產(chǎn)    YNB    100g    BR
    進(jìn)口、國產(chǎn)        1公斤    
    進(jìn)口、國產(chǎn)        10公斤    
白明膠    進(jìn)口、國產(chǎn)    Gelatin    500克    CP
蛋白胨    進(jìn)口、國產(chǎn)    Peptone    250克    BR
胰化蛋白胨    進(jìn)口、國產(chǎn)    Tryptone    250克    BR
    進(jìn)口、國產(chǎn)        500克    
示蛋白胨    進(jìn)口、國產(chǎn)    Tryptose    250克    BR
    進(jìn)口、國產(chǎn)        500克    
原代細(xì)胞