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    原代細胞傳代次數(shù)

    時間:2018/1/25閱讀:315
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    原代細胞傳代次數(shù)—傳代次數(shù)是指對一個細胞系進行分批傳代的頻度(通常在一個實驗室范圍內)。某些細胞系相比較其他細胞系而言較不穩(wěn)定,可能會隨著培養(yǎng)時間的延長而改變,視不同的細胞系和培養(yǎng)條件而定。因此名稱相同的同一細胞系在生理學和形態(tài)學(以及轉染能力)性質也可能會有很大的差異。一般而言,細胞在凍存復蘇后的一兩代之內或直到它們*復蘇之前都很難轉染。細胞數(shù)量(融合率)——只要培養(yǎng)基質(組織培養(yǎng)皿)尚有空間,細胞就會按指數(shù)規(guī)律分裂。對于正常細胞而言,細胞生長的速度受細胞密度大小的抑制(接觸抑制),但癌細胞則不受此限制而會繼續(xù)生長并可互相疊加。營養(yǎng)物質的耗竭以及代謝廢物的積聚會影響所有的細胞生長。細胞會因受到營養(yǎng)物質匱乏的壓力而不適于轉染。報告基因的表達率與轉染開始時的細胞數(shù)量和細胞健康以及細胞溶解之前的生長情況相關。

    培養(yǎng)物污染——培養(yǎng)物可被細菌、酵母、真菌、病毒、支原體、甚至其他細胞種類所污染。各種污染都會導致產生錯誤的結果。支原體污染——支原體污染在所有培養(yǎng)細胞中的比例為5-35%,它可改變細胞生長特性,酶的作用途徑,細胞膜的組成,染色體結構,以及轉染效率。特別是,原代細胞支原體對采用脂質、DEAE-右旋糖酐、磷酸鈣或腺病毒介導的轉染技術有所干擾,其結果致使非典型轉染或轉染效率偏低。這些影響會導致實驗結果的不可靠以及時間和珍貴細胞系的損失。和細菌及真菌不同,支原體污染無法通過視覺檢查發(fā)現(xiàn)。它們非常小甚至能夠通過大多數(shù)的無菌濾膜;它們還對常用抗生素有抗藥性。所以必需進行支原體污染的常規(guī)篩查。
     白介素2IgG    小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α)
     白介素2受體γ鏈IgG    小鼠黑色素(MC Ab)
     白介素31受體aIgG    小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)
     白介素32IgG    小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)
     白介素33IgG    小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)
     白介素33IgG    小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α) 
     白介素3IgG    小鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)
     白介素3受體a鏈IgG    小鼠骨粘連蛋白(ON)
     白介素4IgG    小鼠骨形成蛋白6(BMP-6) 
     白介素5IgG    小鼠骨形成蛋白(BMPs) 
    原代細胞

     

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