細(xì)胞周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 返回列表頁(yè)

抗體制備過(guò)程：
1.材料與試劑
  a．提取的動(dòng)物 Ig
  b．弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
  c．青霉素和鏈霉素
  d．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
  e．其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實(shí)驗(yàn)活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無(wú)菌采制）

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單抗的制備過(guò)程：
1.動(dòng)物免疫：注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細(xì)胞：與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合，人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
3.細(xì)胞融合：淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細(xì)胞的篩選：HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。（含次黃嘌呤（H）、氨基喋呤（A）及胸腺嘧啶核苷（T）的一種培養(yǎng)基，其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān)，骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型，不能利用，被淘汰）
5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞：體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體。或者，將雜交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi)，從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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實(shí)驗(yàn)原理 :
（1）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞，通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而，抗體可通過(guò)與病毒或毒素的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。
（2）活補(bǔ)體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
（3）結(jié)合細(xì)胞：不同類(lèi)別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，參與免疫應(yīng)答。
（4）產(chǎn)品僅用于科研可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
（6）抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類(lèi)沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
單克隆抗體：
1.概念：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。
2.特點(diǎn)：化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強(qiáng)，靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用：
（1）診斷疾病：診斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
（2）藥物導(dǎo)向治療：運(yùn)用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
（3）分離和純化抗原分子。
甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基表皮角化細(xì)胞ECG2 (sophagus cancer-related gene-2)  食道癌相關(guān)基因（抗原）

卵黃甘露高鹽瓊脂基礎(chǔ)前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基真皮成纖維細(xì)胞fgL2 (Fibrinogen-like 2)  凝血酶原酶 (又稱(chēng)：纖維介素蛋白；前凝血素)

改良Giolitti-Cantoni 肉湯前脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基軟骨細(xì)胞FLIP S/L peptide  凋亡調(diào)節(jié)基因之一（多肽抗原）

Vogel–Johnson 瓊脂基礎(chǔ)間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基破骨細(xì)胞FoxP3  叉頭蛋白3-T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子（多肽抗原）

哥倫比亞CNA瓊脂間充質(zhì)干細(xì)胞成骨細(xì)胞分化培養(yǎng)基皮膚肥大細(xì)胞GAD-65 (glutamate decarboxylase)  谷氨酸脫羧酶-65(抗原)

堿性蛋白胨水（APW）間充質(zhì)干細(xì)胞脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基前脂肪細(xì)胞GAP-43 ( Growth associated protein-43 )  生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43（抗原）

堿性蛋白胨水（APW）平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基成骨細(xì)胞Gastrin  胃泌素（抗原）

堿性蛋白胨水（APW）神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase)  α－甲基酰基輔酶A消旋酶抗原

Melamine/Biotin  生物素標(biāo)記兔抗三聚胺IgG過(guò)敏毒素C3（補(bǔ)體C3）2,5-二甲氧基二Rat Hp-IgM (Helicobacter Pylori IgM) 檢測(cè)試劑盒

GHR /FITC  熒光素標(biāo)記生長(zhǎng)激素受體IgG癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子1-甲基-L-組氨酸Rat PMP3 (Peroxisomal Membrane Protein 3) 檢測(cè)試劑盒

Ghrelin/FITC  熒光素標(biāo)記腦腸肽（一種新的生長(zhǎng)激素釋放肽）IgG細(xì)胞質(zhì)多聚腺苷酸結(jié)合蛋白11-甲基-L-組氨酸Rat PPAR-γ (Peroxisome Proliferator-Activated Receptor γ) 檢測(cè)試劑盒

GHRF/GHRH /FITC  熒光素標(biāo)記生長(zhǎng)激素釋放激素因IgG半胱氨酸蛋白酶抑制劑71-甲基-L-組氨酸Rat PPAR-α (Peroxisome Proliferators Activator Receptors alpha) 檢測(cè)試劑盒

GIP/FITC  熒光素標(biāo)記胃泌素抑制肽IgG22號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框29BOC-L-4-氨酸Rat PI Ab-IgG/IgM (Phosphatidylinositol Antibody IgG/IgM) 檢測(cè)試劑盒

TNFRSF18/FITC  熒光素標(biāo)記糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體IgG神經(jīng)細(xì)胞表面蛋白F3BOC-L-4-氨酸Rat P-PKC (Phospho Protein Kinase C) 檢測(cè)試劑盒

GIG8/ID2/FITC  熒光素標(biāo)記DNA結(jié)合抑制因子2IgG組織蛋白酶CBOC-L-4-氨酸Rat PERK (Phospho-Extracellular Signal-Regulated Kinase) 檢測(cè)試劑盒

Glasses Snake poison Protein/FITC  熒光素標(biāo)記抗眼鏡蛇蛇毒蛋白（眼鏡蛇）IgG半胱胺酸蛋白酶蛋白-4雙(三環(huán)己基磷)鈀(0)Rat PIKBα (Phospho-Inhibitory Subunit Of NF-KBα) 檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體多孢霉Mouse ITGB3 (Integrin Beta 3)  Kit

諾爾斯氏鏈霉Mouse MIP-3β(Macrophage Inflammatory Protein 3β)  Kit

乳酸乳球乳亞種Mouse MIP-5 (Macrophage Inflammatory Protein 5)  Kit

棘托竹蓀Mouse MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor)  Kit

假蒼白桿Mouse H4 (Histone H4)  Kit

臭曲霉Mouse MHCI/H-2Ⅰ(Major Histocompatibility ComplexⅠ)  Kit

*枯草芽胞桿Mouse MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ(Major Histocompatibility Complex-Ⅱ)  Kit

球色單隔孢屬M(fèi)ouse MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ(Major Histocompatibility Complex-Ⅲ)  Kit
多克隆抗體定制：
當(dāng)機(jī)體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng)，由機(jī)體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白，這就是免疫球蛋白，這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動(dòng)物所產(chǎn)生的抗血清實(shí)際上是多種抗體的混合物,稱(chēng)為多克隆抗體。由于具有可識(shí)別多個(gè)表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)，產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
（1）IgG ：血清中含量，因此是重要的抗感染分子，包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補(bǔ)體，結(jié)合并增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能（調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)），穿過(guò)胎盤(pán)，保護(hù)胎兒及新生嬰兒免受感染。
（2）IgA ：分單體和雙體兩種。前者存在血清中，后者存在于黏膜表面及分泌液中，是黏膜局部抗感染的重要因素。
（3）IgM ：是分子量大，體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體，具有很強(qiáng)的激活補(bǔ)體和調(diào)理作用，因此是重要的抗感染因子，且常用于診斷早期感染。
（4）IgD ：主要存在于成熟 B 細(xì)胞表面，是 B 細(xì)胞識(shí)別抗原的受體。
（5）IgE ：血清中含量少的抗體，某些過(guò)敏性體質(zhì)的人血清中可檢測(cè)到，參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲(chóng)感染。