elisa分析檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)時應(yīng)該*的條件

elisa分析檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)時應(yīng)該*的條件
1．進(jìn)口Elisa試劑盒固相載體的選擇載體的種類很多，其中包括纖維素、交聯(lián)右旋糖酐、葡萄球菌聚苯乙烯、聚丙烯酰胺等。從使用形式上可有凹孔平板、試管、珠粒等。
聚苯乙烯凹孔板是應(yīng)用zui廣泛的一種載體。聚苯乙烯塑料微量滴定板吸附蛋白的性能好，操作簡便、用量小，適于大批檢查。
由于聚苯乙烯的工藝過程不夠穩(wěn)定,造成各批次差異較大。所以進(jìn)行ELISA之前，必須進(jìn)行篩選。檢查方法：
⑴ 吸附性能的檢查：先加抗體包被，然后加入同一稀釋度的酶標(biāo)抗體，zui后加底物、顯色、測OD值,求出總平均OD值,再求出每相鄰兩孔的OD平均值,此均值在總均值的±10%以內(nèi)為合格,若中間孔與四周孔OD值相差太大，或一側(cè)與另一側(cè)孔OD值相差較大均屬不合格。
⑵ 對比測定陽性血清與陰性血清，觀察是否存在明顯差異，若二者OD值相差于10倍以上者為合格。
板的處理。新板一般不用處理,用蒸餾水沖洗即可應(yīng)用。板用一次即廢。但不少實(shí)驗(yàn)工作者認(rèn)為用超聲波處理，清潔液Tritonx100、20%乙二醇處理仍可應(yīng)用。但發(fā)現(xiàn)空白對照顯色較深和陽性樣品顯色結(jié)果不理想時，應(yīng)棄去不用。 

2．載體的吸附條件  載體的吸附均為物理吸附。吸附的多少取決于PH值、溫度、蛋白濃度、離子強(qiáng)度以及吸附時間等。 
較好的吸附條件是：離子強(qiáng)度為0.05Mol/L～0.10Mol/L，pH9.0～pH9.6碳酸鹽緩沖液，蛋白濃度為1µg/ml~100µg/ml，4℃過一夜或37℃3h。 
3．酶標(biāo)抗體使用濃度的確定于聚苯乙烯板孔中加足夠量的抗體包被,溫育一定時間，沖洗、把酶標(biāo)結(jié)合物倍比稀釋，每個稀釋度加2孔,溫育、沖洗、再加底物顯色、比色。以O(shè)D值為縱坐標(biāo),酶標(biāo)結(jié)合物的稀釋度為橫坐標(biāo)，制作曲線。找出OD值為1時，相對應(yīng)的酶標(biāo)抗體稀釋度為zui適酶標(biāo)抗體稀釋度。 
這個稀釋度是指在這種條件下的zui適稀釋度，換個條件就不是zui適的了。如1﹕400的酶標(biāo)抗體稀釋度溫育6h可與1︰6 400稀釋度溫育24h結(jié)果相同。所以一旦條件確定之后，就不要變更，以保證結(jié)果的重復(fù)性和相對的準(zhǔn)確性。 
elisa分析檢測試劑盒大鼠整合素樣金屬蛋白酶17(ADAM17)ELISA試劑盒    ，英文名：    ADAM17 ELISA Kit    
大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)ELISA試劑盒    ，英文名：    ITG αM/CD11b ELISA Kit    
大鼠整合素α2+β1(ITGA2+ITGB1)ELISA試劑盒    ，英文名：    ITGA2+ITGB1 ELISA Kit    
大鼠整合素α2(ITGA2)ELISA試劑盒    ，英文名：    ITGA2 ELISA Kit    
大鼠蔗糖酶異麥芽糖酶(SI)ELISA試劑盒    ，英文名：    SI ELISA Kit    
大鼠粘膠蛋白/肌腱蛋白C(TN-C)ELISA試劑盒    ，英文名：    TN-C ELISA Kit    
大鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒    ，英文名：    MUC5B ELISA Kit    
大鼠粘蛋白/粘液素C(MUCC)ELISA試劑盒    ，英文名：    MUCC ELISA Kit    
大鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)ELISA試劑盒    ，英文名：    MUC1 ELISA Kit    
大鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)ELISA試劑盒    ，英文名：    REG-1a ELISA Kit    
大鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒    ，英文名：    Apo-H ELISA Kit    
大鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒    ，英文名：    Apo-E ELISA Kit    
大鼠載脂蛋白C-II(APOC2)ELISA試劑盒    ，英文名：    APOC2 ELISA Kit    
大鼠載脂蛋白C-I(APOC1)ELISA試劑盒    ，英文名：    APOC1 ELISA Kit    
大鼠載脂蛋白B-48(ApoB48)ELISA試劑盒    ，英文名：    ApoB48 ELISA Kit    
大鼠載脂蛋白B48(Apo B48)ELISA試劑盒    ，英文名：    Apo B48 ELISA Kit    
大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒    ，英文名：    apo-B100 ELISA Kit    
大鼠載脂蛋白B100(Apo B100)ELISA試劑盒    ，英文名：    Apo B100 ELISA Kit    
大鼠載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA試劑盒    ，英文名：    apo-A5 ELISA Kit    
大鼠載脂蛋白A1前體(Pre-Apo-A1)ELISA試劑盒    ，英文名：    Pre-Apo-A1 ELISA Kit    
大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒    ，英文名：    apo-A1 ELISA Kit    
大鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒    ，英文名：    PROGR ELISA Kit    
大鼠孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒    ，英文名：    PGR ELISA Kit    
大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒    ，英文名：    PROG ELISA Kit    
大鼠誘導(dǎo)型一氧化合成酶(iNOS)ELISA試劑盒    ，英文名：    iNOS ELISA Kit    
大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒    ，英文名：    iNOS ELISA Kit 
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