elisa分析檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理說明書

elisa分析檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：

1. 采用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中 人組織因子途徑抑制物 (TFPI)ELISA Kit 水平。
2. 首先用純化的人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISAKit抗體包被微孔板，制成固相抗體。
3. 然后往包被單抗的微孔中依次加入組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISAKit，再與HRP標(biāo)記的組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISAKit抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成 藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。
4. 顏色的深淺和樣品中的組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISAKit呈正相關(guān)。
5. zui后用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISAKit濃度。
目的：測(cè)定人的血清，血漿及相關(guān)液體樣本中組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISAKit的含量。
6. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
7. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒。仔細(xì)收集上清，如有沉淀，再次離心。
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