磷酸化 AKT 蛋白 （AKT）ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

磷酸化 AKT 蛋白 (AKT)ELISA試劑盒操作步驟：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為360 ng/L,240ng/L ,120 ng/L,60ng/L,30 ng/L）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.磷酸化 AKT 蛋白 (AKT)ELISA試劑盒 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
130597-100 螢火蟲(chóng)熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒 100 次
130597-100 螢火蟲(chóng)熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒 100 次
130596-200 熒光染色細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 200 次
130596-200 熒光染色細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 200 次
130596-200 熒光染色細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 200 次
130595-100 雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒 100 次
130595-100 雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒 100 次
130595-100 雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒 100 次
130594-20 HRP 標(biāo)記內(nèi)參抗體 (β-Tubulin) 20μL
130594-20 HRP 標(biāo)記內(nèi)參抗體 (β-Tubulin) 20μL
130594-20 HRP 標(biāo)記內(nèi)參抗體 (β-Tubulin) 20μL
130593-20 HRP 標(biāo)記內(nèi)參抗體 (GAPDH) 20μL
130593-20 HRP 標(biāo)記內(nèi)參抗體 (GAPDH) 20μL
130593-20 HRP 標(biāo)記內(nèi)參抗體 (GAPDH) 20μL
130592-20 HRP 標(biāo)記內(nèi)參抗體 (β-actin) 20μL
130592-20 HRP 標(biāo)記內(nèi)參抗體 (β-actin) 20μL
磷酸化 AKT 蛋白 (AKT)ELISA試劑盒