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當前位置：上海邦景實業有限公司>>技術文章>>ELISA實驗擴增產物在凝膠中異常分述
ELISA實驗擴增產物在凝膠中涂布或成片狀條帶彌散異常分述：
1、酶量過高。減少酶量；酶的質量差，調換另一來源的酶。
2、dNTP濃度過高。減少dNTP的濃度。
3、MgCl2濃度過高。可適當降低其用量。
4、模板量過多。質粒DNA的用量應<50ng，而基因組DNA則應<200ng。
5、引物濃度不夠優化。對引物進行梯度稀釋重復PCR反應。
6、循環次數過多；增加模板量減少循環次數至30，縮短退火時間及延伸時間，或改用二種溫度的PCR循環。
7、退火溫度過低。
8、電泳體系有問題：
①凝膠中緩沖液和電泳緩沖液濃度相差太大；
②凝膠沒有凝固好；
③瓊脂糖質量差。
9、若為PCR試劑盒則可能：
①由于運輸儲存不當引起試劑盒失效；
②試劑盒本身質量有問題，如引物選擇、循環參數等選擇不當。
10、降解的陳舊模板擴增也易產生涂布。
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