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    初級(jí)會(huì)員 | 第10年

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    elisa試劑盒
    原代細(xì)胞
    細(xì)胞系
    細(xì)胞培養(yǎng)試劑
    血清
    細(xì)胞因子
    標(biāo)準(zhǔn)品
    生化試劑
    RNA/DNA提取
    PCR檢測(cè)試劑盒
    elisa kit
    細(xì)胞
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    PCR相關(guān)試劑

    ELISA試劑盒檢測(cè)血清注意要點(diǎn)

    時(shí)間:2022/8/30閱讀:325
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         ELISA試劑盒檢測(cè)血清使用說(shuō)明     大部分elisa檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按慣例方法收集,應(yīng)留意防止溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為符號(hào)的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)添加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,?菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)發(fā)生假陽(yáng)性反應(yīng)。

        ELISA試劑盒檢測(cè)血清注意要點(diǎn):

    1、要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類(lèi)似過(guò)氧化物的活性,因而,在以HRP為符號(hào)酶的ELISA測(cè)定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡(jiǎn)單在溫育過(guò)程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反應(yīng)顯色。

    2、冰凍保存的血清標(biāo)本須留意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生損壞效果,然后引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留意,不要進(jìn)行劇烈振蕩,重復(fù)倒置混勻即可。

    3、標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細(xì)菌污染所造成的的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心沉積后取上清檢測(cè)。

    4、樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的成長(zhǎng),其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作符號(hào)的測(cè)定方法發(fā)生非特異性攪擾。

    5、血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作別離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的長(zhǎng)期保存,應(yīng)在-70℃以下。


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