單克隆抗體制備的基本過程

單克隆抗體制備的基本過程如下：

1、用抗原免疫小鼠；

2、從抗原免疫過的小鼠獲取脾細胞；

3、應用細胞雜交技術使骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合，得到雜交瘤細胞。這種細胞不僅能夠像B淋巴細胞一樣合成性質穩(wěn)定的轉移性抗體，而且能夠像骨髓瘤細胞一樣無限復制，這樣就可以產生大量且性質專一的鼠源抗體；

4、對獲得的雜交瘤細胞進行篩選，選出能分泌高效價抗體的雜交瘤；

5、對已篩選出的單個細胞進行鑒定和克隆。

雜交瘤產生的單克隆抗體在各個領域中應用越來越廣，有很大的優(yōu)點和潛力。能夠根據需要進行研發(fā)生產，可建立穩(wěn)定的細胞株持續(xù)供給應用，相比于抗血清能夠減少大量的動物和費用，而且純度高，均一性好，可作為一種標準試劑。

在獲得能分泌高效價抗體的雜交瘤細胞株后，一般有兩種方法來獲得單克隆抗體：小鼠腹腔注射雜交瘤細胞和細胞培養(yǎng)。

1）、小鼠腹水：

將雜交瘤細胞接種到小鼠的腹腔，雜交瘤在腹腔內增殖，取得腹水進行純化即可得到抗體。此法易于操作，重復性高，且花費少，得到的抗體量多，但傷害動物，而且當需要大規(guī)模制備抗體時需要大量動物。

2）、細胞培養(yǎng)：

將雜交瘤細胞進行培養(yǎng)，培養(yǎng)后的上清液中即含有抗體。這種方法適合大規(guī)模生產抗體。但是這種方法獲得的抗體雜質相對較多，因為細胞上清含有培養(yǎng)液，pH指示劑，細胞代謝廢物等。而且培養(yǎng)用的血清中的成分不明確，可能會含有能影響抗體純度的雜蛋白。所以在細胞培養(yǎng)中會逐漸將雜交瘤細胞通過逐步減少血清來馴化到無血清培養(yǎng)。

總之，單克隆抗體的高特異性，重復性使其在生物研究以及醫(yī)藥方向都有良好的應用基礎以及前景。