ELISA實驗標本出現的七大問題

                                         ELISA實驗標本出現的七大問題

1．凝血不充分：
   此類錯誤排在*位，主要是抗凝血中存在小凝塊，多發生在血常規檢測中，為采血后標本沒有充分顛倒混勻所致；另外，標本量過多，由于抗凝劑的相對不足，血漿中出現微血凝塊的可能性增加。微血凝塊除易阻塞檢測儀器外，由于血液內部分成分的消耗而影響檢測結果。一份只有仔細檢查才能發現小凝塊的標本，可以使血小板降低30%甚至更多，紅細胞、白細胞計數也可以降低10%左右。我們規定，對用于血常規的標本均輕輕顛倒并仔細觀察，絕大部分可以檢查出。

2．抗凝劑與血液比例不正確：
   在凝血功能測定中，常有一些標本量明顯不足，特別是兒童和入院檢查病人標本，由于小孩采血難，入院時需檢查項目多，zui易發生抽血量不足，使PT、KPTT和TT假性延長，將誤導臨床診治。因此，血液未到刻度的標本一律退回重抽。

3．標本溶血：
   許多指標在紅細胞內和血清（血漿）明顯不同，溶血可使LDH、HBDH、血K+、AST 、ALT或等值異常升高。此類錯誤是采血時的一些不良習慣造成，如：壓脈時間過長，采血不順利、抽血速度太快、血液注入容器時未取下針頭或用力過猛、等均可造成溶血。我們作過實驗，選擇20位體格檢查者，用兩種方法進行比較：⑴用注射器抽血后不去除針頭直接將針頭插入真空采血管，這時在真空管負壓作用下針管內的血液被吸入；⑵用注射器抽血后先除去針頭，然后打開真空采血管蓋子緩緩注入標本，兩種采血方法的標本同時作部分生化項目檢測，結果是：前者比后者LDH上升23.4%－58.2%，平均33.7%；HBDH上升22.5%－61.4%，平均35.4%；AST上升6.7%－31.6%，平均13.7%；ALT上升4.7%－18.2%，平均11.4%；血K+上升23.7%－71.2%，平均36.1%，其它如TP、GGT和UREA等也有或多或少的變化。因此，我們主張用真空采血系統自然流出的標本為宜，如果必須用注射器抽血，抽血后要取下針頭，再緩緩將血液注入標本采集管。對于未用真空采血系統的單位，若注射器和針頭連接不緊，采血時有空氣進入或產生泡沫，使用劣質采血器，標本收集管沒有干燥均易造成溶血。

4．采血部位不當：
   有些病人需多次檢查，或輸液時間較長，有的護士會在病人輸液更換瓶子時放出一些血液送檢，即使先去除前面的10ml血液，結果也有明顯變化。如一例輸脂肪乳后直接從輸液的靜脈中采血，導致了許多結果錯誤，影響前三位的是：TG為12.4mmol/L(平時為1.0 mmol/L左右)，血小板達560×109/L（上升了4倍多），總蛋白濃度從60左右上升到91.6(g/L)。其它常有明顯影響的有血糖、血電解質等項目。雖臨床也知道正確的采血方法，但由于護理人員流動性大，工作量超負荷，不時有此類標本送檢，只有反復與臨床溝通、宣傳，加上對標本審核，對于血細胞比例明顯不對，結果不合理或有異常變化，及時與臨床，減少不合格報告發出。

5．采血量不足：
   對于血培養而言,采血過少可降低培養的陽性率。有文獻報告,當培養的血量從2ml增加至20ml時,血培養的陽性率增加30%—50%,培養血量每增加1ml,陽性率增加3%—5%。由于標本已經注入培養瓶，不能檢查是否符合要求，只有加強溝通交流，共同努力提高檢驗質量。

6．標本采集時間不當：
   對細菌培養、激素檢查、找瘧原蟲或絲蟲病原體，需在特定的時間，以提高陽性率。

7．標本運送和處理不及時：
    標本的運送雖不屬采集范疇，但標本采集再規范，若不能及時送檢，將嚴重影響檢驗質量。尿常規標本需在二小時內檢測完成，否則細胞等有形成分開始破壞；離體過長的標本作血細胞分析時會影響分類結果；生化檢測的標本也因為細胞內外物質交換而變化。我們要求標本及時送檢，到檢驗中心的標本盡快測定，不能及時測定的生化、免疫等標本及時分離血清，加蓋并置4℃冷藏。