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  • 上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
    初級(jí)會(huì)員 | 第10年

    15000017673

    elisa試劑盒
    原代細(xì)胞
    細(xì)胞系
    細(xì)胞培養(yǎng)試劑
    血清
    細(xì)胞因子
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    大鼠TARDNA結(jié)合蛋白43elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟和計(jì)算結(jié)果判定

    時(shí)間:2019/1/16閱讀:362
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    大鼠TAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP)elisa分析檢測(cè)試劑盒操作步驟:

    1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
    2.加樣:分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
    3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
    4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
    5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
    6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
    7.溫育:操作同 3。
    8.洗滌:操作同 5。
    9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
    10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
    11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
     

    大鼠TAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP)elisa分析檢測(cè)試劑盒計(jì)算和結(jié)果判定:

    試驗(yàn)有效性:陽性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.10
    臨界值(CUT OFF)計(jì)算:臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
    陰性判定:樣品 OD 值< 臨界值(CUT OFF)者為金黃色葡萄球菌腸毒素(SE)陰性 陽性判定:樣品 OD 值≥ 臨界值(CUT OFF)者為金黃色葡萄球菌腸毒素(SE)陽性。
     

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