PCR“平臺(tái)效應(yīng)”相關(guān)因素介紹

“平臺(tái)效應(yīng)"是指PCR后期循環(huán)產(chǎn)物累積趨于飽和，使原來以指數(shù)增長(zhǎng)的速率變成平坦的曲線，同時(shí)出現(xiàn)非特異產(chǎn)物的大量增加的現(xiàn)象。下列因素可能與平臺(tái)效應(yīng)有關(guān)：

（1）dNTP或引物的消耗量。

（2）反應(yīng)物的穩(wěn)定度（dNTP或酶）

（3）最終產(chǎn)物的阻化作用（焦磷酸鹽、雙鏈DNA）。

（4）非特異產(chǎn)物或引物二聚體與反應(yīng)物的競(jìng)爭(zhēng)。

（5）產(chǎn)物在高濃度時(shí)變性不全，影響引物的延伸。

（6）酶與PCR產(chǎn)物的結(jié)合，使酶分子減少。

合理的PCR循環(huán)參數(shù)，能最大限度地避免這些因素對(duì)產(chǎn)物擴(kuò)增的影響。