凍存細胞收集處理過程

        凍存細胞是通過冷凍保護機制將細胞放在低溫環境，減少細胞代謝，保持細胞活性，以便長期儲存的一種技術。細胞復蘇后，蛋白質仍有活性，細胞的結構和功能仍完好。下面收到凍存細胞收集處理過程：

1、收到快遞后，若發現凍存管破損、箱內已無干冰，請拍照后及時聯系供貨商。

2、收到細胞后請盡快復蘇，給凍存管（外觀×1張）拍照留存，隔天在倒置顯微鏡下確認細胞狀態，給細胞（100倍×2張，200倍×2張）拍照，售后時需提供。

3、復蘇細胞時不可直接將凍存管丟進水浴鍋，用鑷子夾住凍存管頂部，將凍存管下部浸入水中即可，由于水浴鍋處于實驗室暴露、高溫、濕潤環境，極易滋生各種微生物，建議在水浴鍋中加入Deeming水浴鍋安全衛士抑制各類微生物的滋生，大程度上防止水浴鍋中的微生物對凍存細胞造成的污染。

4、在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作，凍存管、試劑、耗材拿進去之前一定要用75%酒精消毒，培養試劑盡量不要共用，若有共用試劑，建議配成完培后整體過濾除菌。

5、原代細胞傳代建議T25培養瓶1:2傳代 ，保種1支，另外1支傳代至T25新瓶，前面代次建議代代保種，以妨出現問題后無種可用，原代細胞需根據生長狀況判斷傳代比例。

6、第一次傳代時需要摸索消化時間，建議每隔30s就觀察一次，并記錄消化時間，細胞會隨著后期傳代次數的增多而延長消化時間。

7、由于細胞在運輸過程中失去原有適宜的生長條件且長時間顛簸，收到細胞進行復蘇后，前1-2代培養可適當提高血清含量以促進恢復細胞原有狀態并縮短到達對數期的時間。

8、原代細胞建議選用廠家供應的專用培養基，否則可能會因為改變培養條件，大大縮短細胞的培養代數，造成種子細胞的浪費。

9、及時更換和補充培養箱水盤內的水，建議加入Deeming細胞培養箱水盤安全衛士進行污染物的預防。

10、 購買的細胞只可用于科研，不得應用于人體。