細(xì)胞培養(yǎng)基種類與基本成分

細(xì)胞培養(yǎng)基種類與基本成分

培養(yǎng)基種類

經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)。

其具體的特征及應(yīng)用如下：

1、BME細(xì)胞培養(yǎng)基基礎(chǔ)Eagle培養(yǎng)基（Basal Medium Eagle），1955年Eagle設(shè)計(jì)，BSS＋12種氨

基酸＋谷氨酰胺＋8種維生素。簡(jiǎn)單、便于添加，適于各種傳代細(xì)胞系和特殊研究用，在此基礎(chǔ)上改良的細(xì)胞培養(yǎng)基品種有MEM、DME、IMDM等。

2、MEM細(xì)胞培養(yǎng)基又稱*Eagle培養(yǎng)基（Minimal Essential Medium），1959年在Eagle's基礎(chǔ)培養(yǎng)基（BME）上修改而來(lái)，刪去賴氨酸、生物素，氨基酸濃度增加，適合多種細(xì)胞單層生長(zhǎng)，有可高壓滅菌品種，是一種基本、試用范圍培養(yǎng)基，但因其營(yíng)養(yǎng)成分所限，針對(duì)之特定細(xì)胞培養(yǎng)與表達(dá)時(shí)，并不一定是使用效果培養(yǎng)基。

3、DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基，起初是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L，后來(lái)為了某些細(xì)胞的生長(zhǎng)需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L，這就是大家常說(shuō)的低糖和高糖了。低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，特別適用于生長(zhǎng)速度快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。高糖更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，也適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來(lái)生長(zhǎng)點(diǎn)的克隆培養(yǎng)，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。例如CHO細(xì)胞表達(dá)乙肝疫苗、CHO細(xì)胞表達(dá)EPO。

4、IMDM細(xì)胞培養(yǎng)基Guilber和Iscove將Dulbecco' Medium改良為Iscove's Medium，用于培養(yǎng)紅細(xì)胞和巨噬細(xì)胞前體。此種培養(yǎng)液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進(jìn)小鼠B淋巴細(xì)胞，LPS