環孢素A（CsA）elisa定量檢測試劑盒操作步驟和儲存方式

環孢素A（CsA）elisa定量檢測試劑盒  操作步驟

1.加樣：分別設標準孔、待測樣品孔、空白孔。設標準孔 7 孔，依次加入 100μL 不同濃度的標準品 （見試劑準備 2）?？瞻卓准?100μL（見試劑準備第二步*后一管），余孔加待測樣品 100μL，酶標板加上覆膜，37℃ 溫育 2 小時。

2.棄去液體，甩干，不用洗滌。

3.每孔加檢測溶液 A 工作液 100μL（臨用前配制），酶標板加上覆膜，37℃ 溫育 1 小時。

4.棄去孔內液體，每孔用 300μL 的洗滌液洗滌，浸泡 1-2 分鐘，吸去 （不可觸及板壁） 或甩掉酶標板內的液體，在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次 （也可輕拍將孔內液體拍干），重復洗板 3 次。*后一次洗滌后，要把孔內的洗滌液*甩干。自動洗板機亦可。

5.每孔加檢測溶液 B 工作液 （臨用前配制）100μL，加上覆膜，37℃ 溫育 1 小時。

6.棄去孔內液體，甩干，洗板 5 次，方法同步驟 4。

7.每孔加底物溶液 90μL，酶標板加上覆膜，37℃ 避光顯色 （反應時間控制在 15-25 分鐘，不要超過 30 分鐘。當標準孔的前 3-4 孔有明顯的梯度藍色，后 3-4 孔梯度不明顯時，即可終止）。

8.每孔加終止溶液 50μL，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物溶液的加入順序相同。如出現顏色不勻一，請輕輕晃動酶標板以使溶液混合均勻。

9.在確保酶標板底無水滴及孔內無氣泡后，立即用酶標儀在 450nm 波長測量各孔的光密度 （O.D. 值）。

環孢素A（CsA）elisa定量檢測試劑盒  儲存方式

標本的采集與保存：收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。