研究人員一直對細胞中的蛋白質(zhì)互作有著濃厚的興趣,因為蛋白質(zhì)互作可以揭示zui基礎(chǔ)的生命功能,比如細胞分裂。
研究人員開發(fā)了在活細胞中研究蛋白質(zhì)行為的新技術(shù),這一技術(shù)允許人們實時跟蹤推動一個生物學(xué)過程的蛋白質(zhì)網(wǎng)絡(luò),可以用來研究特定疾病的發(fā)病機制,幫助制藥公司開發(fā)新的藥物靶標(biāo)。單分子檢測在生命科學(xué)領(lǐng)域有巨大的應(yīng)用潛力,熒光相關(guān)光譜技術(shù)(FCS)就是其中之一。FCS誕生于上世紀(jì)七十年代,主要通過熒光標(biāo)記在活細胞中研究生物分子的動態(tài)。FCS可以檢測和定位不同蛋白質(zhì)的動態(tài),這樣的數(shù)據(jù)具有很高的研究價值。不過FCS顯微分析相當(dāng)麻煩,數(shù)據(jù)解讀也比較困難,目前還局限于少量蛋白的短期實驗。
為此,研究人員開發(fā)了高通量的FCS技術(shù)(HT-FCS)。HT-FCS可以實現(xiàn)自動化的篩選、延時數(shù)據(jù)獲取和數(shù)據(jù)分析,是在活細胞中研究蛋白質(zhì)組動態(tài)的有力工具。這一方法可以節(jié)省大量的時間,研究人員解釋道,“之前研究者可能要花一天時間在少量細胞中觀察一個蛋白,而我們可以自動在數(shù)千個細胞中獲得數(shù)十個蛋白的數(shù)據(jù)。"為了展示HT-FCS的實用性,研究人員用該技術(shù)分析了53個核蛋白的動態(tài)。他們在一萬個人類活細胞中獲得了六萬個檢測值,并利用這些生理參數(shù)根據(jù)染色體結(jié)合和復(fù)合體形成情況對蛋白進行分類。
“我們將FCS開發(fā)成高通量技術(shù),以便同時獲得大量蛋白的數(shù)據(jù)。這種能力對于研究生物學(xué)網(wǎng)絡(luò)很有幫助,因為生物學(xué)網(wǎng)絡(luò)通常包括幾十甚至幾百個組分,"研究人員說。
研究人員認(rèn)為,高通量和穩(wěn)健性能使HT-FCS得到廣泛的應(yīng)用,幫助人們在活細胞中分析蛋白質(zhì)網(wǎng)絡(luò)的動態(tài)。