實(shí)驗(yàn)研究檢測(cè)抗體采購(gòu)注意事項(xiàng)

抗體是完成免疫組織化學(xué)染色的主要試劑，可將其分為特異性一抗(或稱(chēng)一級(jí)抗體)和第二抗體(或稱(chēng)二級(jí)抗體，也可稱(chēng)為二抗或標(biāo)記二抗)，尤其特異性一抗更為重要。目前國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)各種特異性抗體日益增多，銷(xiāo)售公司也很多，大多數(shù)使用者直接選用市售現(xiàn)成商品。

    抗體質(zhì)量的好壞是完成免疫組化工作的關(guān)鍵，目前可從二條途徑獲得。首先可從市場(chǎng)上獲得商品化抗體，這是主要來(lái)源。但有時(shí)為了研究或證實(shí)一種新的抗原成分，而又無(wú)相應(yīng)抗體可購(gòu)買(mǎi)時(shí)，往往需要自己制備抗血清。當(dāng)然，也可以從文獻(xiàn)上查找，并向作者索要。

    原則上應(yīng)選擇在較高稀釋度時(shí)染色較佳、背景較低、結(jié)果穩(wěn)定、重復(fù)性好的商品化抗體。目前供IHC研究和診斷用的抗體種類(lèi)繁多，商如林，不同廠家的相同抗體，其價(jià)格、包裝及抗體的*工作濃度差異較大。在選購(gòu)時(shí)，應(yīng)多聽(tīng)取有實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)專(zhuān)家的意見(jiàn)。另外，還應(yīng)考慮抗體的種屬。

    一般用于診斷、鑒別診斷的抗體zui常見(jiàn)的是兔和小鼠的單克隆抗體，并注明可用于診斷，其價(jià)格也較昂貴；而用于研究用的抗體，其種屬較多，例如兔、小鼠、羊、大鼠和雞的抗體等，其價(jià)格相對(duì)廉價(jià)，品種較新。購(gòu)買(mǎi)抗體前要了解清楚是否與實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的檢測(cè)試劑配套和能用于何種切片類(lèi)型檢測(cè)，例如冰凍切片或石蠟切片，一般需購(gòu)置能用于石蠟切片檢測(cè)的。

    此外，還應(yīng)了解清楚是否需要何種前處理(酶消化或抗原修復(fù))，以及抗體的*稀釋度等問(wèn)題。購(gòu)置能用于石蠟切片，稀釋度在1：100以上的抗體。

    在購(gòu)置用于實(shí)驗(yàn)研究檢測(cè)的抗體時(shí)，應(yīng)認(rèn)真閱讀其產(chǎn)品的說(shuō)明介紹。因?qū)嶒?yàn)研究用的抗體種類(lèi)特別繁多，而且很新，檢測(cè)的對(duì)象往往是各種動(dòng)物標(biāo)本，如狗、兔、猴、大鼠、小鼠、豬等。

    各廠家生產(chǎn)的抗體，尤其是基因抗體，往往是針對(duì)人、或某種動(dòng)物的，或各種動(dòng)物有交叉，但有一部分抗體只針對(duì)人或鼠，對(duì)其他動(dòng)物無(wú)交叉反應(yīng)，如需檢測(cè)犬類(lèi)或兔組織標(biāo)本中的某些抗原時(shí)，就無(wú)法檢測(cè)到。因此，在選擇此類(lèi)抗體時(shí)，一定注意掌握其背景資料。

    另外，購(gòu)置抗體后，一定請(qǐng)公司告知其生產(chǎn)日期、商品號(hào)(cat，lot)、檢測(cè)范圍和用何種前處理方式等。