上海滬鼎介紹：人促甲狀腺素釋放激素ELISA試劑盒操作實驗原理

人促甲狀腺素釋放激素（TRH）ELISA試劑盒實驗原理：
人促甲狀腺素釋放激素（TRH）ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人促甲狀腺素釋放激素（TRH）水平。用純化的人促甲狀腺素釋放激素（TRH）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入促甲狀腺素釋放激素（TRH），再與HRP標記的促甲狀腺素釋放激素（TRH）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促甲狀腺素釋放激素（TRH）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人促甲狀腺素釋放激素（TRH）水平。

ELISA試劑盒優勢：
     1、、靈敏、特異的抗體
     2、穩定的重復性和可靠性
     3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體
     4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型
     5、種屬齊全：人（Human）、大鼠（Rat）、小鼠（Mouse）、猴（Monkey）、兔（Rabbit）、豬   （Pig）、馬（Horse）、魚、雞、鴨、羊等等
      6、可檢測指標齊全：細胞因子檢測、心肌梗塞檢測、內分泌檢測、肝纖維化檢測、自身免疫檢測、腫瘤標志物檢測、傳染病檢測、特種蛋白檢測、優生優育檢測等等。 

人促甲狀腺素釋放激素（TRH）ELISA試劑盒操作步驟：
1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180U/mL, 120U/mL , 60U/mL, 30U/mL,15 U/mL）。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應
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