滬鼎生物|淺談一下細胞培養(yǎng)基的小知識吧~

細胞培養(yǎng)現(xiàn)在已成為應用于生命科學的主要技術(shù)之一，它是從生物機體中取出部分組織分散成單個細胞或直接從機體取出單個細胞，并將它們在有利于生長的人工環(huán)境中培養(yǎng)的統(tǒng)稱。細胞最適生長的基本環(huán)境是適當?shù)臏囟龋己玫募毎街|(zhì)和適當?shù)呐囵B(yǎng)液和培養(yǎng)箱，能夠保持正確的pH值和滲透壓。

在動物細胞培養(yǎng)中最重要和最關(guān)鍵的一步是選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液用于體外培養(yǎng)。生長培養(yǎng)基或培養(yǎng)基是液體或凝膠狀態(tài)的，設(shè)計用于支持微生物、細胞或小的植株生長。培養(yǎng)基是控制最佳的細胞生長最重要和最復雜的因素。細胞培養(yǎng)基通常包括適當?shù)募毎芰縼碓春驼{(diào)節(jié)細胞周期的化合物。一個典型的培養(yǎng)基還需要補充氨基酸，維生素，無機鹽，葡萄糖，和血清，以提供生長因子、激素、和附著因子。除了營養(yǎng)外，培養(yǎng)基也有助于保持培養(yǎng)體系中的pH值和滲透壓平衡。

一、細胞培養(yǎng)基的類型：

動物細胞的培養(yǎng)可以使用chun天然的培養(yǎng)基或人工/合成的培養(yǎng)基混合一些天然產(chǎn)物。

1. 天然培養(yǎng)基

天然培養(yǎng)基僅由天然生成的生物液體組成。天然培養(yǎng)基適用于多種不同的動物細胞培養(yǎng)。但由于缺乏對這些天然培養(yǎng)基確切成分的認識，使用天然培養(yǎng)基的主要缺點是可重復性差。

2. 人工培養(yǎng)基

人工培養(yǎng)基通過人為地加入一些營養(yǎng)物質(zhì)（有機的和無機的）、維生素、鹽、O2和CO2氣體、血清蛋白、碳水化合物、輔因子，制備成人工或合成的培養(yǎng)基。

不同的人工培養(yǎng)基被分別設(shè)計用于下面的幾個用途： 

1）及時生存（平衡的鹽溶液，有特定的pH和滲透壓）；

2）長時間生存（ping衡鹽溶液輔以各種配方的有機化合物和/或血清） ；

3）不確定生長  ；

4）特定功能。

二、培養(yǎng)基中的血清：

血清是白蛋白、生長因子和生長抑制劑的復雜混合體。血清是細胞培養(yǎng)基中最重要的組分之一，作為氨基酸、蛋白質(zhì)、維生素（特別是zhi溶性維生素，如A，D，E，和K）、碳水化合物、脂質(zhì)、激素、生長因子、礦物質(zhì)和微量元素的來源。通常會在培養(yǎng)基中使用胎兒和小牛來源的血清來支持細胞生長。胎兒血清含有豐富的生長因子，適當細胞克隆和難以培養(yǎng)的細胞的生長。胎兒血清被用于接觸抑制研究，因為它較低的生長促進特性。正常的生長培養(yǎng)基往往包含2-10%的胎兒血清。

培養(yǎng)基中補充血清具有以下作用：

1）血清未細胞提供了基本的營養(yǎng)成分（在溶液中和結(jié)合到蛋白質(zhì)上的）。

2）血清為生長促進和特定細胞功能提供多種生長因子和激素。

3）提供了多種結(jié)合蛋白質(zhì)，如白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白，可以攜帶其他成分進入細胞。例如：白蛋白可攜帶脂類、維生素、激素等進入細胞。

4）還可提供蛋白質(zhì)，如纖連蛋白，促進細胞附著到基質(zhì)上。它提供擴散因子幫助細胞在分裂前擴散。

5）提供蛋白酶抑制劑，保護細胞免受降解。

6）提供礦物質(zhì)，如Na+，K+，Zn2 +，F(xiàn)e2 +等。

7）增加培養(yǎng)基的粘性，因此保護細胞在懸浮培養(yǎng)攪拌過程中免受機械損傷。

8）還可以作為一種緩沖液。

由于存在生長因子和酶抑制劑，血清在細胞培養(yǎng)中的作用是非常復雜的。除了提供各種功能，在組織培養(yǎng)中使用血清也存在優(yōu)缺點。

1.培養(yǎng)基中使用血清的優(yōu)點：

①血清包含多種生長因子和激素，可以刺激細胞生長和發(fā)揮功能

②可幫助細胞附著

③可作為擴散因子

④作為緩沖劑幫助維持生長培養(yǎng)基的pH值

⑤可作為結(jié)合蛋白

⑥減小機械損傷或由攪拌造成的損傷

2.培養(yǎng)基中使用血清的缺點：

①血清成分缺乏均一性

②在使用每一批前都需要檢測以確保質(zhì)量

③可能包含一些生長抑制因子

④增加污染的可能

⑤培養(yǎng)基中存在血清可能干擾細胞培養(yǎng)產(chǎn)物的純度和分離