如何配胰蛋白酶溶液

    在細胞培養中我們會經常用到胰蛋白酶溶液。在試驗中胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質水解從而使細胞離散。古朵生物技術支持部分特別整理這篇文章，告訴你如何配胰蛋白酶溶液。

    胰蛋白酶溶液的配制：

    （1）稱取胰蛋白酶粉末置燒杯中，先用少許D-Hanks平衡鹽溶液（pH7.2左右）調成糊狀，然后再補足D-Hanks平衡鹽溶液，攪拌混勻，置室溫4小時或冰箱過夜，并不斷攪拌振蕩；

    （2）次日，先用濾紙粗濾，再進行過濾除菌，分裝入瓶中，低溫冰箱保存備用，常用濃度為0.25%或0.125%。胰蛋白酶溶液偏酸，使用前可調用碳酸氫鈉溶液調pH至7.2左右。

    保存條件：配制好的胰蛋白酶溶液必須保存在-20℃冰箱中，以免分解失效。

    EDTA?4Na溶液

    EDTA是一種化學螯合劑，對細胞有一定的離觧作用，而且毒性小，價格低廉，使用方便。常用工作液濃度為0.02%。通常與0.25%的胰蛋白酶溶液按1：1混合使用（混合液）。注意：使用EDTA處理細胞后，一定要用Hanks液沖洗干凈，因殘留的EDTA會影響細胞生長。

    EDTA溶液配制：用無鈣、鎂的D-HBSS平衡鹽溶液溶解后，高壓蒸汽滅菌，分裝成小瓶，室溫或4℃冰箱保存。

    胰蛋白酶–EDTA?4Na溶液（0.05%胰蛋白酶,0.53mMEDTA?4Na）

    0.5g胰蛋白酶＋0.2gEDTA?4Na＋1LD-HBSS。-20℃冰箱中保存。