ELISA 試劑盒生產流程及注意事項

 一、ELISA 試劑盒生產流程

    二、包被
    1.將包被抗原用包被緩沖液配制包被液，每孔取100mL加入酶標板，蓋好蓋板膜，包被條件如下表，4℃16-20h包被時酶標板可以疊放，而37℃2h 包被時酶標板之間的間距應保持一致（一般為 5cm）。根據培養箱的設計調節酶標板間的間距，如培養箱從底部產熱，則應增加下層酶標板間的間距為10cm 。

    2.包被加樣采取吸二打一的方式，應避免加在孔壁上部，若不慎滴加在孔壁上，根據該滴溶液是否應加入孔內再做判斷，若應加入，則小心振蕩使其落入孔底，反之則用吸水紙小心吸出，并注意不可濺出，不可產生氣泡。

    3.包被前預吸查看槍頭是否合格，水流是否一致，不一致者應更換槍頭，包被應采用槍頭，每包被一塊板，應將槍頭套緊，并且在包被的過程中要注意查看吸液是否一致，在包被過程中若出現任何小問題，都應將此塊板做出記號，以便后期組裝入庫時淘汰。
若采用 37℃ 2h 包被模式，則應給酶標板編碼，保證每塊板子的包被時間一致。

    三、洗板
    1.包被后要進行兩次洗滌，250微升/孔，洗滌完畢后，應在毛巾上拍干參與液體，并及時進行下一步封閉。

    2.洗滌時要注意查看水流是否一致，在洗滌程中若出現任何小問題，都應將此塊板做出記號，以便后期組裝入庫時淘汰。

    四、封閉
    1.封閉液應提前一小時取出初步回溫，用前搖勻，每孔取 180 mL 加入酶標板，蓋好蓋板膜，37℃封閉 1.5h, 酶標板之間的間距應保持一致（一般為 5cm）。根據培養箱的設計調節酶標板間的間距，如培養箱從底部產熱，則應增加下層酶標板間的間距為 10cm 。

    2.封閉加樣采取吸一打一的方式，應避免加在孔壁上部，若不慎滴加在孔壁上，根據該滴溶液是否應加入孔內再做判斷，若應加入，則小心振蕩使其落入孔底，反之則用吸水紙小心吸出，殘留在槍頭內的溶液不要打出 以免產生氣泡。并注意不可濺出，不可產生氣泡

    3.封閉前預吸查看槍頭是否合格，水流是否一致，不一致者應更換槍頭，封閉應采用槍頭，每封閉一塊板，應將槍頭套緊，并且在包被的過程中要注意查看吸液是否一致，在封閉過程中若出現任何小問題，都應將此塊板做出記號，以便后期組裝入庫時淘汰。

    五、烘干裝袋
    1.封閉完后，摔倒孔內液體，并在毛巾上拍干，接下來采取烘干或者晾干的方式*干燥酶標板。烘干：37 ℃倒置（不加蓋板膜或用自封袋），每 5 塊板烘干 30 min，隨著板子數量增多時間相應延長，如 100 塊板，需要烘 3 h，依次類推；晾干：底部鋪一層干凈的 A4 紙或者吸水紙，倒置板子，在頂層鋪一層蓋住避光，室溫晾 18-24h。

    2.板子干燥后，應及時裝入自封袋，按照每塊板 1 袋干燥劑的量裝入，袋子外面寫好板子制備日期，放入本成品庫冷藏環境保存備用。