關于ELISA包被如何優化 上海滬鼎給您一個的答案!

    我們知道，ELISA的每項步驟都進行完善優化后，讓實驗達到狀態也是必然的事了。那么關于ELISA包被條件如何優化呢？上海滬鼎給您一個的答案:
    

1.包被抗原的選擇 
    包被抗原可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。天然蛋白需經純化 才能用直接吸附法包被，對于含雜質較多的抗原可以采 用間接捕獲法包被(先用能 夠與目的抗原反應的物質如抗體直接吸附在酶標板上，再通過特異性反應使抗原固 相化)。經純化的重組蛋白一般皆可直接包板。小分子 抗原比如多肽以及一些小分 子有機化合物，由于分子量太小，往往難于直接吸附在酶標板上，一般都先使其與 無關蛋白質如BSA等偶聯，偶聯物吸附于固相載體上。  
   

2.包被液的選擇 
    一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液，如果包被的抗原在堿性條件下不穩定的話 ，也可以使用pH7.2的磷酸 鹽緩沖液。 
   

3.包被溫度的選擇 
    通常是4-8度條件下過夜或者37度保溫2小時，我們強烈建議4-8度條件下包被， 有利于蛋白活性的保 持。  
    

4.包被濃度的選擇 
    包被的zui適濃度隨固相載體和包被物的性質變化，一般蛋白質的包被濃度為1- 5ug/ml，要明確針對特定包 被抗原的zui適包被濃度需要通過實驗來確定。 
    

    另外還有一個相關重點問題值得討論，包板后需要封閉嗎？應該選擇什么樣的 封閉體系？上海滬鼎技術員特別說明：封閉是否必要，取決于ELISA的模式及具體的 實驗條件。一般說來，雙抗體夾心法，只要酶標記物是高活性的，操作時洗滌* ，不經封閉也可得到滿意的結果。而在間接法測定中，封閉一般是*的。 
 

    公司為廣大客戶提供高質量的免疫學和生命科學相關產品。質量可靠，被全國各大院校科研機構認可并為ELISA試劑盒標準品對照品長期供應商之一。我們將以專業執著，精益求精的精神服務于廣大科研用戶。