滬鼎教你如何避免ELISA實(shí)驗(yàn)中“花板”出現(xiàn)

Elisa試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法，ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中有很多因素影響著實(shí)驗(yàn)結(jié)果，導(dǎo)致出現(xiàn)“花板"問(wèn)題。為了避免“花板"問(wèn)題的出現(xiàn)，降低檢測(cè)的假陽(yáng)性率，獲得更理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，首先我們?cè)谶x擇ELISA試劑時(shí)，應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、價(jià)格操作方便、省時(shí)的試劑。并在檢驗(yàn)的過(guò)程中應(yīng)采取下列措施:

(1)檢測(cè)之前，加大離心轉(zhuǎn)速，盡量延長(zhǎng)時(shí)間，使血細(xì)胞和纖維蛋白充分沉淀，讓血細(xì)胞與血清*分離。

(2)抽取樣本時(shí)應(yīng)抽出足夠檢驗(yàn)量的血液標(biāo)本，選擇無(wú)添加劑的真空試管，ELISA試劑盒便于離心，得到足夠的血清。

(3)血液標(biāo)本應(yīng)置于室溫下1～2h，使血液凝固收縮，然后離心檢測(cè)或讓血液過(guò)夜后再檢測(cè)。這樣才能使得血液充分收縮，讓標(biāo)本中的非特異性物質(zhì)所致的假陽(yáng)性率降至zui低。

(4)加樣時(shí)不能加入紅細(xì)胞或纖維蛋白，要按照操作說(shuō)明書去做，否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

(5)封板溫育時(shí)，各孔一定要封嚴(yán)，防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。

(6)手工洗板時(shí)應(yīng)注意液體被濺出或孔與孔之間的液體溢出，連成整體液面后產(chǎn)生“花板"。

(7)洗液的溫度也會(huì)影響洗板的干凈程度，尤其是冬天溫度過(guò)低時(shí)容易出現(xiàn)“花板"問(wèn)題。

(8)用洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過(guò)程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。

因此，ELISA試劑盒出現(xiàn)“花板"原因可能是在標(biāo)本的處理，特別是放置時(shí)間、離心速度和離心時(shí)間及溫度方面的問(wèn)題。所以，標(biāo)本的處理就成為實(shí)驗(yàn)結(jié)果的主要可疑因素。

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