過氧化氫檢測試劑盒使用說明書

過氧化氫檢測試劑盒使用說明：
1. 樣品測定的準(zhǔn)備：
    （1）細(xì)胞或組織樣品的制備 
    對于培養(yǎng)的細(xì)胞，先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，棄上清，按照每100萬細(xì)胞加入100-200微升過氧化氫檢測
    裂解液的比例加入裂解液，隨后充分勻漿以破碎并裂解細(xì)胞。4℃約12000g離心3-5分鐘，取上清，用
    于后續(xù)測定。組織樣品按照每5-10mg組織加入100-200微升裂解液的比例進(jìn)行勻漿。4℃約12000g離
    心3-5分鐘，取上清用于后續(xù)測定。以上所有操作均需在4℃或冰上操作。制備好的細(xì)胞或組織樣品如
    果不立即測定，可以-20℃凍存。
    （2）培養(yǎng)細(xì)胞上清液樣品的制備 
    培養(yǎng)細(xì)胞的上清液可以直接用于后續(xù)的測定。 
    （3）血清、血漿或尿液樣品的準(zhǔn)備：
    配制50mM磷酸緩沖液，pH為6.0。用pH為6.0的50mM磷酸緩沖液把樣品稀釋50倍。例如4微升樣品稀釋
    到196微升pH為6.0的50mM磷酸緩沖液中。稀釋后即可用于后續(xù)的測定。
2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線測定的準(zhǔn)備：
    樣品在什么溶液中標(biāo)準(zhǔn)品也需用什么溶液稀釋，這樣可以減小誤差。例如對于細(xì)胞樣品，標(biāo)準(zhǔn)品宜用
    過氧化氫檢測裂解液稀釋，對于培養(yǎng)細(xì)胞的上清液樣品，標(biāo)準(zhǔn)品宜用相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋。標(biāo)準(zhǔn)溶
    液可以稀釋成1、3、10、30、100微摩爾/升，或1、2、5、10、20、50、100微摩爾/升，初次測定后
    知道樣品的濃度范圍后可以對標(biāo)準(zhǔn)品在樣品濃度范圍附近密集測定。
3. 過氧化氫濃度的測定：
    （1）把過氧化氫檢測試劑在冰上或冰水浴上融解。 
    （2）在檢測孔或檢測管內(nèi)加入50微升樣品或標(biāo)準(zhǔn)品。 
    （3）在每個孔內(nèi)加入100微升過氧化氫檢測試劑。 
    （4）輕輕振蕩或敲打混勻，室溫（15-30℃）放置30分鐘。然后立即測定A560。如測A560有困難，波長
       可以選擇540-570nm。
    （5）根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中過氧化氫的濃度。