膠體金探針的質(zhì)量鑒定

1。金顆粒的大小及均勻度
用有Formvar支持膜的鎳網(wǎng)蘸取金標(biāo)記試劑，空氣干燥后，透射電鏡下觀察金顆粒的大小及均勻度，計(jì)算平均直徑，如電鏡放大倍數(shù)10萬，照片放大為2．5倍，100000×2．5＝250000＝25nm。空氣中干燥后乙酸鈾負(fù)染，在透射電鏡下觀察，可見金顆粒周圍有一明顯的空暈，表示顆粒表面吸附著蛋白質(zhì)分子。

支持膜（火棉膠膜）的制備；50mil5％的火棉膠+50mi乙酸戊酯，戊酯火棉膠。

2。用免疫細(xì)胞化學(xué)濾紙模型鑒定免疫金制劑的特異性和敏感性制得2．5％的乙酸
在WhatmamI號(hào)濾紙條上滴加2//l的抗原溶液（含抗原量分別為1ug、l00ng、10ng、3ng和lng），干燥后，紙條在甲醛蒸氣中固定。加適當(dāng)稀釋的抗體作用1h，用TBS（0．05mol/LpH7．4Tris緩沖液，含．15mol/LNaCl），1％Triton X-l00洗3次，每次10rain。隨后，紙條再用洗脫SephacrylS-400柱的相同洗脫緩沖液洗lOmin，再滴加不同稀釋度的金標(biāo)探針孵育1h。紙條再用TBS-Triton緩沖液洗3次，每次10rain。用TBS（不含TritonX—100）洗10min。再用雙蒸水洗3次各5min。用銀顯影液顯影30—40min。用雙蒸水洗終止顯影。