PAL人L苯丙氨酸解氨酶ELISA試劑盒實驗原理 返回列表頁

ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
氨基磺銨別名: 磺一銨鹽;氨磺銨英文名稱: AMS: 7773-06-0分子式: H6N2O3S

無水肌有效期: 2年級別: AR 溶解性: 5 mg/mlWar別名: 無水肌;N-甲基胍基

鹽洗必泰有效期: 3年級別: AR溶解性: 1mg/10ml in EtOH別名: 鹽洗必泰;己定，1,1'-己基雙[5-(對)雙胍]鹽鹽

反-查耳有效期: 2年溶解性: 別名: 查耳;酰;基乙烯;蘇合香稀甲;乙烯基本;芐差乙;亞芐基代乙;查爾英文名稱: Trans-Chalcone

4--DL-基丙氨有效期: 2年溶解性: 50 mg/mL in 1N HCl英文名稱: 2-Amino-3-(4-Chlorophenyl)Propionic Acid: 7424-00-2

纖維素別名: 醋纖維素;纖維素醋酯;二乙酰纖維素英文名稱: MCA: 9004-35-7儲存條件: RT

扎銨別名: 二甲烷銨;烷安銨;化甲羥胺;芐烷銨化物;代（烴基二甲基甲）胺;二烷基化銨;化甲烷銨;扎銨;潔爾滅;英文名稱: Benzalkonium chloride: 63449-41-2分子式: C9H13NRCl

2,3-二氨基萘有效期: 2年別名: 2,3-萘二胺;英文名稱: DAN: 771-97-1
PAL人L苯丙氨酸解氨酶ELISA試劑盒實驗原理phospho-Akt/FITC  熒光素標(biāo)記抗磷化蛋白激酶B抗體IgG抗體（采用活疫苗制備）3-溴乙基苯Mouse NUP160 (Nucleoporin 160kDa) ELISA Kit  

CEA/Gold  膠體金標(biāo)記癌胚抗原抗體IgG活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體(S)-(-)-1-(4-溴苯)乙胺Mouse NUP188 (Nucleoporin 188kDa) ELISA Kit  

Aldolase A/FITC  熒光素標(biāo)記縮酶A抗體IgG腺苷激酶-1抗體(S)-(-)-1-(4-溴苯)乙胺Mouse NUP205 (Nucleoporin 205kDa) ELISA Kit  

ALK/CD246Ag /FITC  熒光素標(biāo)記間變型淋巴瘤激酶抗體IgG纖維狀肌動蛋白抗體(S)-1-(4-基)乙胺Mouse NUP214 (Nucleoporin 214kDa) ELISA Kit  

phospho-ALK/CD246(Tyr1586) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大鼠磷化間變型淋巴瘤激酶抗體IgG聚集蛋白抗體(S)-1-(4-基)乙胺Mouse OBTF1 (Octamer Binding Tranion Factor 1) ELISA Kit  

ALK/CD246(phospho Tyr1278/1282/1283) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、鼠磷化間變型淋巴瘤激酶抗體IgG調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體1,10-菲啰啉-5,6-二Mouse OBTF2 (Octamer Binding Tranion Factor 2) ELISA Kit  

ALK/CD246(phospho Tyr1604) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、鼠磷化間變型淋巴瘤激酶抗體IgG調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體1,10-菲啰啉-5,6-二Mouse OLFM4 (Olfactomedin 4) ELISA Kit   

ALR/FITC  熒光素標(biāo)記肝再生增強(qiáng)因子抗體IgG間變型淋巴瘤激酶抗體4-氮雜苯并咪唑Mouse ITLN1 (Inectin 1/Omentin) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)