ADP人脂聯(lián)素ELISA試劑盒實驗原理 返回列表頁

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿，細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等

ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果，可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)！

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樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
Bacillus│timonensis 芽胞桿菌(加詞待譯)Bacillus│timonensis分離基物:樣/養(yǎng)豬場沼氣池沼液斜面培養(yǎng)物模式菌株:no潛在的生物轉(zhuǎn)化微生物/未經(jīng)過單菌驗證的反硝化菌33生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Bacillus│cohnii 科氏芽胞桿菌Bacillus│cohnii分離基物:沉積物/TVG表層沉積物凍干物模式菌株:no潛在的有機污染物降解菌/分離自十溴聯(lián)醚富集菌群471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Erythrobacr│vulgaris 普通赤桿菌Erythrobacr│vulgaris分離基物:沉積物/硫化物凍干物安全等級:1模式菌株:no471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Brachybacrium│sacelli 教堂短桿菌Brachybacrium│sacelli分離基物:沉積物/箱式樣品凍干物安全等級:1模式菌株:no海洋放線菌471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Lentibacillus│sp. 慢生芽孢桿菌Lentibacillus│sp.分離基物:沉積物/重力活塞取樣凍干物模式菌株:no潛在的新種471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：98%

Aquimarina│spongiae 海綿海桿菌Aquimarina│spongiae分離基物:生物樣/海綿斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:471生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%

Aquimarina│gracilis 海桿菌(加詞待譯)Aquimarina│gracilis分離基物:生物樣/貽貝腸道內(nèi)容物斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%

Pseudochrobactrum│kiredjianiae 克氏假蒼白桿菌Pseudochrobactrum│kiredjianiae分離基物:沉積物/表層沉積物凍干物安全等級:1模式菌株:no潛在的無機污染物抗性菌/分離自Cr富集菌群1001生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%,含0.1 % 對二酚 穩(wěn)定劑
ADP人脂聯(lián)素ELISA試劑盒實驗原理Phospho-MYPT1 (Thr696)  磷化肌球蛋白磷酶抗體血管生成素相關(guān)蛋白6抗體5--2-(基)苯酚Mouse CCB (Calcium Channel Blockers) ELISA Kit

Phospho-MYPT1 (Thr853)  磷化肌球蛋白磷酶抗體Muellerian繆勒管激素抑制因子抗體阿糖腺苷一水合物Mouse CaSR (Calcium Sensing Receptor) ELISA Kit

SM22 Alpha  骨架相關(guān)蛋白抗體酪氨蛋白激酶受體A8抗體4-氨基-7-(基)喹啉Mouse CACYBP (Calcyclin Binding Protein) ELISA Kit

Smoothened/SMOH  跨膜蛋白Smoothened抗體脂肪酰輔酶A家族成員1抗體4-氨基-7-(基)喹啉Mouse CIAP (Calf Intestinal Alkaline Phosphatase) ELISA Kit

Regucalcin/SMP30  衰老標(biāo)記蛋白30抗體芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣2抗體十二Mouse CNX (Calnexin) ELISA Kit

Snake poison Protein  蛇蛋白抗體（蝮蛇）磷化芳香胺N-乙?；D(zhuǎn)移酶抗體十二Mouse T (Calpastatin) ELISA Kit

Snake poison Protein  蛇蛋白抗體（中華眼鏡蛇）肌動蛋白結(jié)合蛋白1抗體苯頻哪酯Mouse CRT (Calreticulin) ELISA Kit

SNAP-25   突觸相關(guān)蛋白25抗體粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體苯頻哪酯Mouse CR (Calretinin) ELISA Kit