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    大鼠源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

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      上海撫生實業有限公司
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    大鼠源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

    1、試劑盒簡介貨為了適應大鼠源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒快速檢測和疫病研究的需要,本公司參照 OIE 國際標準中規定的引物序列,經多次實驗及系統優化,開發了本試劑盒。應用本試劑盒進行檢測具有快速、靈敏、特異、準確、安全操作簡單、應用廣泛和高通量檢測等特點及優點。2、試劑盒組成:
    試劑盒組成包括核酸提取試劑和核酸擴增試劑,具體組成參見表 1:s
    表 1:試劑盒組成(50test/盒)


    操作流程:

    1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

    2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

    3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

    4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

    5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

    6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

    7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

    樣本:血清 血漿 組織勻漿等液體樣本
     
    標記物:血清 血漿 組織勻漿等
     
    應用:僅用科研實驗檢測定量,定性檢
     
    檢測方法:夾心法
     
    技術要求:全程按說明書步驟檢測,操作規范,專業,儀器設備齊全。

    規格:48t/96t 

    性狀:液體 

    運輸方式:快遞發貨 

    有效期:6個月品

    特點:靈敏性高,---性,吸附均勻,吸附性好,回收利用率高,是一款可以讓您放心選購的產品。

    使用范圍:此產品供科研實驗使用,不得用于---。

    用途:用于測定人血清、血漿、組織及相關液體樣本中的含量或活性。

    樣本處理及要求:
    1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
    2.  血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
    3.  組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
    4.  細胞培養物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
    注:本公司提供試劑盒免費代測服務。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。

    試劑盒組成及試劑配制:
    1.  酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。 
    2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
    3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
    4. 生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
    5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
    6. 生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
    7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
    8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
    9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
    10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

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