細(xì)胞傳代問(wèn)題解決方案

細(xì)胞傳代問(wèn)題解決方案：

1、傳代密度過(guò)高

　一旦細(xì)胞養(yǎng)太久至融合度過(guò)高(>90%)才傳代，容易使細(xì)胞產(chǎn)生老化現(xiàn)象，甚至是堆疊，再消化細(xì)胞時(shí)不易吹打成單顆細(xì)胞，即便再重新鋪盤(pán)傳代，細(xì)胞也無(wú)法回到原本的特性了。(如：?jiǎn)螌蛹?xì)胞，沒(méi)長(zhǎng)滿就發(fā)生堆疊現(xiàn)象)。

　解決方案：

　　盡量避免融合度過(guò)高，鏡下觀察融合度約達(dá)到80%即可傳代分盤(pán)。

　　細(xì)胞融合度：在細(xì)胞培養(yǎng)中指的是細(xì)胞在培養(yǎng)表面(培養(yǎng)皿/瓶)所占的比例。

2、傳代密度過(guò)低

　哺乳動(dòng)物貼壁培養(yǎng)細(xì)胞，若細(xì)胞培養(yǎng)到80-90%密度需要開(kāi)始傳代，在傳代接種細(xì)胞密度過(guò)低，細(xì)胞間距離太遠(yuǎn)，就無(wú)法在細(xì)胞間產(chǎn)生黏附及通信作用，幫助信號(hào)傳導(dǎo)并活化細(xì)胞；總體細(xì)胞量不足，分泌的生長(zhǎng)因子濃度會(huì)不足以產(chǎn)生利于生長(zhǎng)的微環(huán)境，以上皆會(huì)造成增殖速度遲緩或細(xì)胞死亡。

　解決方案：

　　細(xì)胞傳代時(shí)，要進(jìn)行準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)，確保鋪盤(pán)的密度。