鮑皰疹樣病毒PCR檢測試劑盒操作說明

時間：2019/12/6閱讀：301

十二月的家鄉(xiāng)，雪，開始洋洋灑灑地飄舞。地上的麥子同老人和孫子的目光一起瘋長。回歸的候鳥，捎來了老人的、孫子的父親回歸的消息。家鄉(xiāng)桃樹的芽孢，開始萌動。接下來介紹鮑皰疹樣病毒PCR檢測試劑盒操作說明。

以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度：以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點，被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點，這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

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