ELISA快速檢測原理

ELISA快速檢測試劑盒與經典色譜法相比，具有操作過程簡單、樣品處理快捷，可同時分析多個樣品，分析時間短、成本低、靈敏度高且對環境污染小等優點。
1 原理
ELISA方法的基本原理是酶分子與抗體或抗體分子共價結合，此種結合不會改變抗體的免疫學特性，也不影響酶的生物學活性。此種酶標記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發生特異性結合。
2 試樣的準備
2.1 對于尿樣可直接用于檢測，或者樣品比較渾濁時，可適當離心。當尿樣冷凍時，應將尿樣回溫再測。
2.2 飼料樣品要按照說明書的處理步驟進行。當然，為保證樣品充分被提取，可適當延長渦旋時間、離心時間及離心轉數。
3 試劑的準備
3.1 不同批次的試劑盒不能混用，因為抗體和微孔板具有盒與批次的特異性。
3.2 按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測量較正。
3.3 從冰箱中取出的實驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次實驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。
3.4 IL-11elisa試劑盒檢測過程中應盡量保持室溫20~25℃，避免在通風口操作，溫度過低、過熱或蒸發都會影響檢測數據的準確性。同樣不應再陽光直射下實驗，防止過熱或蒸發帶來影響。
4 加樣
4.1 在ELISA中一般有4次加樣步聚，即加標本或樣品、酶結合物、底物、終止液。加樣時應將所加物加在板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產生氣泡，當有氣泡時可用干凈的槍頭小心刺破。
4.2 加標準及樣品時一般用微量加樣器，按規定的量加入板孔中，每次加標本應更換吸嘴，以免發生交叉污染。
4.3 在加酶標物、底物、終止液時，建議盡量使用多道移液槍，以縮短反應時間。尤其是酶標物和底物液用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。當然，多道移液槍適合整板樣品的檢測，加酶標物、底物、終止液時可整瓶加入。如果只需要對少量樣品檢測時，加酶標物、底物、終止液動作一定要迅速、準確，避免槍頭碰壁或液體濺出。