漆酶試劑盒測定步驟

漆酶試劑盒測定意義漆酶（Laccase）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中，具有較強的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環境污染物降解和木質纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應用。

樣品測定的準備：

1、細胞、細菌或組織樣品的制備 ：

細菌或細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，棄上清；按照每100萬細菌或細胞加入1mL提取液，超聲波破碎細菌或細胞（功率20％，超聲3秒，間隔10秒，重復30次），之后置沸水浴振蕩提取10min；10000g，常溫離心10min，取上清，冷卻后待測。

組織：稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進行冰浴勻漿；之后置沸水浴振蕩提取10min，10000g，常溫離心10min，取上清，冷卻后待測。

2、血清（漿）樣品：取100μL血清（漿）加入1mL提取液，充分混勻，之后置沸水浴振蕩提取10分鐘，10000g，常溫離心10分鐘，取上清，冷卻后待測。

3、標準品的處理：稱取1mg，將標準品稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。

漆酶試劑盒測定步驟：

1、分光光度計預熱30min以上，調節波長至520nm，蒸餾水調零。

2、取0.5mL上清液（或稀釋后的標準品）+0.5mL試劑一+0.5mL試劑二于有蓋試管中，置沸水浴中保溫30min（蓋緊，防止水分散失），每10min振蕩一次。

3、待冷卻后，在試管中加入1mL試劑三，振蕩30s，靜置片刻，使色素轉至試劑三；吸取0.8mL-1mL上層溶液于1mL玻璃比色皿中，用試劑三調零，于520nm波長處比色，記錄吸光值。

4、根據標準品吸光值和濃度，建立標準曲線。