豚鼠白介素2elisa檢測試劑盒試劑盒的組成和操作步驟

豚鼠白介素2elisa檢測試劑盒的試劑盒的組成：

組成： 

（1）結合物及標本的稀釋液；

（2）洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；

（3）酶標記的抗原或抗體（結合物）；

（4）酶的底物；

（5）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），elisa試劑盒參考標準品和控制血清（定量測定中）；

（6）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑） 

豚鼠白介素2elisa檢測試劑盒的操作步驟

1.加樣：分別設標準孔、待測樣品孔、空白孔。設標準孔 7 孔，依次加入 100μL 不同濃度的標準品 （見試劑準備 2）。空白孔加 100μL（見試劑準備第二步*后一管），余孔加待測樣品 100μL，酶標板加上覆膜，37℃ 溫育 2 小時。

2.棄去液體，甩干，不用洗滌。

3.每孔加檢測溶液 A 工作液 100μL（臨用前配制），酶標板加上覆膜，37℃ 溫育 1 小時。

4.棄去孔內液體，每孔用 300μL 的洗滌液洗滌，浸泡 1-2 分鐘，吸去 （不可觸及板壁） 或甩掉酶標板內的液體，在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次 （也可輕拍將孔內液體拍干），重復洗板 3 次。*后一次洗滌后，要把孔內的洗滌液*甩干。自動洗板機亦可。

5.每孔加檢測溶液 B 工作液 （臨用前配制）100μL，加上覆膜，37℃ 溫育 1 小時。

6.棄去孔內液體，甩干，洗板 5 次，方法同步驟 4。

7.每孔加底物溶液 90μL，酶標板加上覆膜，37℃ 避光顯色 （反應時間控制在 15-25 分鐘，不要超過 30 分鐘。當標準孔的前 3-4 孔有明顯的梯度藍色，后 3-4 孔梯度不明顯時，即可終止）。

8.每孔加終止溶液 50μL，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物溶液的加入順序相同。如出現顏色不勻一，請輕輕晃動酶標板以使溶液混合均勻。

9.在確保酶標板底無水滴及孔內無氣泡后，立即用酶標儀在 450nm 波長測量各孔的光密度 （O.D. 值）。