大鼠熱休克蛋白70elisa檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)試劑準(zhǔn)和操作步驟

大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)elisa檢測試劑盒試劑準(zhǔn)備：
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶：試劑盒提供6管標(biāo)準(zhǔn)品，每管已標(biāo)定濃度，并且凍干。實(shí)驗(yàn)前在每個標(biāo)準(zhǔn)品管中加入0.5mL樣本稀釋液，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動助其溶解，使其恢復(fù)為每個標(biāo)準(zhǔn)品管身標(biāo)注的濃度。
2. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)elisa檢測試劑盒操作步驟：
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃;                      2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔，空白孔什么都不加；標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL； 3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；                                                    4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中（空白孔不加）加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。                                         5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。                                                                                     6. 所有孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。                                                     7. 所有孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。