<tfoot id="qqie6"></tfoot>
<ul id="qqie6"></ul> 
13585886131
當(dāng)前位置：上海邦景實業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>PCR反應(yīng)中的引物二聚體應(yīng)對方法
PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制，PCR的最大特點，是能將微量的DNA大幅增加。如果反應(yīng)出現(xiàn)了引物二聚體，有許多方法可以減少或消除反應(yīng)中的引物二聚體。
1、 首先是優(yōu)化熱循環(huán)條件，這主要是提高退火溫度。大多數(shù)情況下，兩步循環(huán) (由 95°C 變性步驟直接進(jìn)入60°C 退火和延伸步驟) 有利于強(qiáng)效擴(kuò)增，因此引物設(shè)計時設(shè)定的成功退火溫度為 60°C。
2、可降低引物濃度，甚至采用不同的正向引物和反向引物的比值也有一定的幫助。大多數(shù)情況下，每條引物的理想最終濃度為 200 nM，但如有需要，可將濃度降至 60 nM。
3、鎂的最佳濃度一般約為 3 mM。高于此濃度易形成引物二聚體。
4、如果未對引物形成二聚體的傾向進(jìn)行評估，則應(yīng)補(bǔ)充評估并考慮重新設(shè)計 (如有需要)。通常情況下，最好使用熱啟動 DNA 聚合酶，并在冰上進(jìn)行反應(yīng)。
5、在理論上，針對同一靶點應(yīng)同時檢測多個引物組。這實際上可以節(jié)省大量時間，因為如果這些引物中的一個能立即發(fā)揮作用，則可以減少花費(fèi)在優(yōu)化過。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。
