elisa檢測試劑盒原理的程序

elisa檢測試劑盒原理：

    采用競爭法測定金黃地鼠氧化elisa檢測試劑盒水平。用金黃地鼠氧化抗原包被微孔板，制成固相載體，實驗時依次在微孔板中加入標本及標準品，并加入HRP標記的OXLDL抗體，標本及標準品中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結合。反復洗滌后加底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化為藍色，再用硫酸終止反應，轉變成黃色。標本中抗體量越多，結合在固相上的酶標抗體愈少，顏色越淺。顏色的深淺和樣品中的OXLDL含量呈負相關。采用酶標儀在450nm波長測定吸光度（OD值），根據標準曲線，計算測試樣品中OXLDL濃度。

elisa檢測試劑盒操作程序：

1. 棄去液體，甩干，每孔加滿稀釋后洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。如此重復5次，拍干。

2. 每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。。

3. 取出酶標板，每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

4.測定：以空白孔調零，在450nm波長下測量各孔的吸光度值（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

5.根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據elisa檢測試劑盒樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。也可以使用各種應用軟件來計算。應記住由于樣品稀釋了的，其實際濃度應該乘以總稀釋倍數。

elisa檢測試劑盒試劑盒性能：

1. 準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。

2. 靈敏度：zui低檢測濃度小于（參考說明書）

3. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4. 重復性：板內、板間變異系數均小于15%。

5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

6. 有效期：6個月。